張倩 鄭州大學
1材料與方法
1.1實驗材料
本實驗所用的野葛根采自河南省信陽市董家河鄉(xiāng)的山區(qū)，東經(jīng) 114005，，北緯32“12，海拔為430一450m，采于秋季，標本植株經(jīng)河南中醫(yī)學院標本館館長劉若庸教授鑒定為野葛根 [Puerarialobata(Wind.)Ohwi」，并經(jīng)本課題組對其HPLC指紋圖譜進行分析。野葛根經(jīng)切片，干燥后運抵現(xiàn)場，飼喂前粉碎過60目篩。
1.2實驗動物選擇與分組
選擇產(chǎn)奶水平、泌乳階段、胎次相同或相近的健康泌乳中期荷斯坦奶牛18頭，隨機等分為實驗組和對照組，每組9頭并逐一編號。實驗于2009年n月28日一12月26日在國家重要技術標準研究示范企業(yè)與示范基地—山東曹縣銀香偉業(yè)集團養(yǎng)殖基地進行。
1.3實驗處理
實驗組每頭牛飼喂混合精料和野葛根1500留d，對照組飼喂與實驗組等能量混合精料和玉米13859/d，粗飼料自由采食。
1.4飼養(yǎng)管理
牛舍為隔欄開放棚式舍，室外設有運動場供活動。由專人負責牛舍內(nèi)飼養(yǎng)管理，精料統(tǒng)一配制，定量配發(fā)，粗飼料自由采食，自由飲水，每天喂料三次，每天利用脈沖式真空吸奶裝置自動擠奶三次。專人負責飼喂野葛根，每天將野葛根分三次混入少量精料中，等奶牛采食完畢后，再繼續(xù)飼喂精料。定期消毒牛舍，預防疾病發(fā)生，保持棚舍內(nèi)外的清潔衛(wèi)生。每日定時清掃牛舍和去除糞尿，實驗期間由專人注意觀察奶牛采食情況、排便狀況、精神狀態(tài)和健康情況。混和精料配方見表2.1。
1.5樣品采集與實驗測定
1.5.1奶樣的采集
實驗期每天記錄奶牛的產(chǎn)奶量。每周的最后一天，在早、中、晚擠奶時收集樣品，并按比例(早:中:晚=4:3:3)混勻后，取100mL加入6omg重鉻酸鉀，4℃冷藏，以備乳成分的測定。另取25OmL冷凍保存，用于實驗室分析牛奶成分。
1.5.2糞樣的采集
每周最后一天收集糞樣，稱量記錄，并按比例(早:中:晚=4:3:3)混勻后，干燥粉碎后保存。60℃鼓風烘箱中烘干，粉碎，過40目篩，裝入封口袋內(nèi)備用。
1.5.3乳品質(zhì)指標的測定
MILKYWAY-CP4乳成分分析儀(浙江大學食品科學與發(fā)酵工程研究所)測定乳樣品中的乳蛋白質(zhì)率、乳脂肪率和乳密度等指標。
1.6數(shù)據(jù)分析
數(shù)據(jù)使用SPSS(StatisticalProduetandServieeSolutionS)12.0軟件進行處理，以平均數(shù)士標準差(萬士s)表示，檢驗水準a=0.05。
2結果
2.1飼喂野葛根對奶牛產(chǎn)奶量的影響
對實驗組和對照組奶牛產(chǎn)奶量進行W檢驗，各樣本p均大于0.05，因此奶牛產(chǎn)奶量服從正態(tài)分布，對實驗組和對照組奶牛產(chǎn)奶量進行配對t檢驗。結果顯示，實驗組和對照組差異在a=0.05水準上有統(tǒng)計學意義(尸<0.05)，實驗組產(chǎn)奶量顯著高于對照組。實驗組相對于對照組產(chǎn)奶量提高了2.okg，提高了9.02%。
2.2飼喂野葛根對乳成分的影響
2.2.1飼喂野葛根對牛奶中蛋白質(zhì)含量的影響
實驗組奶牛9頭，對照組奶牛9頭。對實驗組和對照組奶牛牛奶中蛋白質(zhì)含量進行W檢驗，各樣本尸均大于0.05，因此牛奶中蛋白質(zhì)含量服從正態(tài)分布，對實驗組和對照組奶牛蛋白質(zhì)含量進行配對t檢驗。結果顯示，第一周實驗組和對照組蛋白質(zhì)含量的差異在a=0.05水準上有統(tǒng)計學意義(尸=0.023)，實驗組高于對照組。第二周、第三周和第四周的實驗組和對照組差異在a=0.05水準上均有統(tǒng)計學意義(尸二0.001)，實驗組顯著高于對照組。LSD一t法兩兩比較顯示:實驗組各周之間差異無統(tǒng)計學意義(尸>0.05)，即飼喂野葛根后，實驗組牛奶中蛋
白質(zhì)率并不隨時間增加而增長。
2.2.2飼喂野葛根對牛奶中脂肪含量的影響
實驗組奶牛9頭，對照組奶牛9頭。對實驗組和對照組奶牛牛奶中脂肪含量進行W檢驗，各樣本P均大于0.05，因此牛奶中脂肪含量服從正態(tài)分布，對飼喂野葛根對奶牛產(chǎn)奶性能的影響實驗組和對照組奶牛乳脂肪含量進行配對t檢驗。結果顯示，第一周、第二周、第三周、第四周實驗組和對照組乳脂肪率差異均有統(tǒng)計學意義(尸<0.05)，實驗組牛奶中脂肪含量高于對照組。LSD一t法兩兩比較顯示:實驗組各周之間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，即飼喂野葛根后，實驗組牛奶中脂肪含量并不隨時間增加而增長。
2.2.3飼喂野葛根對牛奶密度的影響
實驗組奶牛9頭，對照組奶牛9頭。對實驗組和對照組奶牛牛奶密度進行W檢驗，各樣本尸均大于0.05，因此牛奶密度服從正態(tài)分布，對實驗組和對照組奶牛乳密度進行配對t檢驗。結果顯示，第一周(尸 =0.249)、第二周 (p=0.065)實驗組和對照組乳密度差異在a=0.05水準上無統(tǒng)計學意義。第三周實驗組和對照組乳密度差異有統(tǒng)計學意義(尸=0.011)，實驗組乳密度高于對照組。第四周的實驗組和對照組差異有統(tǒng)計學意義(尸<0.001)，實驗組乳密度高于對照組。LSD一t法兩兩比較顯示:只有第一周實驗組乳密度與第四周實驗組乳密度差異有統(tǒng)計學意義(尸=0.035)，第四周實驗組的牛奶密度大于第一周，說明隨著飼喂時間的增長，實驗組牛奶密度有提高的趨勢，但是差異并不顯著。
2.3飼喂野葛根對奶牛糞量的影響
實驗期內(nèi)實驗組糞便呈褐綠色，中度的粥樣豁稠度，可形成一個圓頂型堆積體，高度在2.5厘米一5.0厘米之間，無明顯未消化的纖維和飼料。野葛根作為飼料，對牛的胃腸道無刺激，在實驗期內(nèi)均未出現(xiàn)明顯的消化道不適現(xiàn)象。對實驗組和對照組奶牛糞便量進行W檢驗，各樣本P均大于0.05，因此糞便量服從正態(tài)分布，對實驗組和對照組奶牛糞便量進行配對t檢驗。結果顯示，實驗組和對照組奶牛糞便量差異有統(tǒng)計學意義(尸=0.026)，實驗組奶牛糞便量高于對照組。(具體見表2.6)
3.討論
野葛根的淀粉含量23.46%一54.62%，纖維含量3.76%一17.58%，蛋白質(zhì)含量4.33%一10.38%，根據(jù)季節(jié)而發(fā)生變化[6]。本課題組研究同時發(fā)現(xiàn)，產(chǎn)地不同，季節(jié)不同，野葛根中成分變化不同。實驗用野葛根采自董家河鄉(xiāng)的山區(qū)，標本采集后經(jīng)河南中醫(yī)學院標本館館長劉若庸教授鑒定為野葛根 [Puerarialobata(Wind.ohwi」，并經(jīng)本課題組對其HPLc指紋圖譜進行分析。不同于利用市售葛根所做的實驗研究。
葛根為中國衛(wèi)生部收錄的藥食兩用食物。實驗期間奶牛對野葛根采食良好，野葛根采食完全，在飼喂中并沒有發(fā)現(xiàn)因添加野葛根而造成奶牛采食量減少的狀況，葛根性味甘平，無不良氣味，作為飼料適宜奶牛采食。野葛根作為飼料，對牛的胃腸道無刺激，在實驗期內(nèi)均未出現(xiàn)明顯的消化道不適現(xiàn)象，說明野葛根作為飼料對奶牛適口性良好。實驗組奶牛排糞量高于對照組?？赡苁且驗楦弋a(chǎn)奶牛的消化代謝比較旺盛，糞便量較大。在飼料中添加野葛根能顯著提高產(chǎn)奶量，產(chǎn)奶量提高2.0k留d，相對于對照組提高了9.02%;顯著提高牛奶中蛋白質(zhì)含量，相比對照組增加了0.13%;實驗組乳脂肪含量相比對照組顯著增加。牛胃由四個胃室組成，即瘤胃、網(wǎng)胃、瓣胃和皺胃。瘤網(wǎng)胃中的微生物主要是分解纖維素的菌群，約占瘤胃活菌的1/4，其次是發(fā)酵淀粉以及糖類的菌群。瘤胃內(nèi)的碳水化合物在多種不同細菌的重疊或相繼作用下通過相應酶系統(tǒng)產(chǎn)生揮發(fā)性脂肪酸，主要是乙酸、丙酸、丁酸，直接由瘤網(wǎng)胃壁進入血液而被吸收，作飼喂野葛根對奶牛產(chǎn)奶性能的影響為能量來源和合成脂肪，生成的二氧化碳和甲烷等以暖氣形式排出體外，所合成的蛋白質(zhì)和維生素B族、維生素K、維生素C等供牛體利用。大部分日糧中的蛋白質(zhì)被瘤胃微生物分解為胃蛋白、氨基酸和氨，各種類型的微生物利用這些化合物來合成其本身的細胞蛋白質(zhì)。有些微生物只能利用胃蛋白或氨基酸，而另一些微生物只能利用氨，這就是非蛋白質(zhì)含氮物可作反當動物蛋白質(zhì)來源的原因。由于葛根中的主要物質(zhì)能被牛吸收利用，這也可能是在實驗期間奶牛未出現(xiàn)消化道不適的另一個原因。
葛根中有許多種多酚類化合物，尤其是異黃酮類化合物，主要為大豆昔元(daidzein)、大豆普(daidzin)、大豆普元4，7一二葡萄糖試(dai由ein一4，7一diglueoside)、葛根素(puerarin)、7一木糖葛根素(puerarin一7一xyloside)、染料木素(ge垃stein)，4，6一二乙酞基葛根素(4，6一。一 diacetylpuerarin)、芒柄花黃素(formononetin，7一經(jīng)基一4甲氧基異黃酮)、金雀異黃素(genistein)等異黃酮衍生物，以及葛雌素(miroesterol)、尿囊素(anantoin)等成分。這些異黃酮化合物屬異黃酮類植物雌激素，具有弱雌激素樣活性。巴音吉日嘎拉等人研究發(fā)現(xiàn)葛根素具有上調(diào)乳腺組織雌激素受體(estrogenrecePtor， ER)表達的作用，這是其促乳腺發(fā)育的作用機理之一[l0]。大豆貳元、染料木素和芒柄花素具有明顯的濃度依賴性的雌激素活性，其中染料木素活性最高，約為雌二醇的1/100011’1。薛曉鷗等人研究發(fā)現(xiàn)野葛根提取物促進未成熟大鼠乳腺發(fā)育，可以增加血清中雌二醇含量[’21。補飼野葛根提取物增加了奶牛產(chǎn)奶量，且產(chǎn)奶量更加穩(wěn)定，血漿中雌二醇(Estradiol，EZ)、皮質(zhì)醇(eortisol，eoR)和催乳素(Pro一actin，P甩)含量，有上升的趨勢。王尚榮和
劉浪采用王不留行、黃蔑、黨參、當歸、路路通、通草、川芍、益母草、白術、甘草等植物原料按一定比例組成植物源性飼料添加劑，能顯著提高奶牛的產(chǎn)奶量。劉福元等采用飼用甜菜根莖替代荷斯坦奶牛常規(guī)日糧中的部分玉米青貯飼料能顯著增加奶牛平均產(chǎn)奶量，乳脂肪率和乳蛋白率也有提高;也有研究報告指出黃茂、王不留行促進奶牛乳腺細胞asl一酪蛋白、p一酪蛋白和乳鐵蛋白的合成，改進其泌乳性能116]。綜合所述，在飼料中添加野葛根有助于提高產(chǎn)奶量，改善奶牛的產(chǎn)奶性能，為奶農(nóng)帶來一定的經(jīng)濟效益。
4.結論
牛糞量顯著增加，并未出現(xiàn)明顯的消化道不適現(xiàn)象。野葛根作為飼料對奶牛適口性良好，日糧中添加野葛根顯著增加了奶牛的產(chǎn)奶量;牛奶中的蛋白質(zhì)含量、脂肪含量顯著增加，促進了奶牛的產(chǎn)奶性能。
