孫黎 西北農(nóng)林科技大學(xué)

    偽狂犬病是由偽狂犬病毒引起的一種傳染病，上世紀(jì)六、七十年代，由于強(qiáng)毒株的出現(xiàn)，該病從之前的發(fā)病癥狀溫和、經(jīng)濟(jì)損失較小驟變成癥狀明顯加劇、經(jīng)濟(jì)損失巨大，在某些地區(qū)，偽狂犬病甚至被認(rèn)為是對(duì)經(jīng)濟(jì)影響最大的豬病毒病。其對(duì)于牛、綿羊、山羊、貓、狗和浣熊等其他家畜和野生哺乳動(dòng)物來說，都是易感病毒。

1. 血清學(xué)與免疫學(xué)診斷方法

1.1 微量血清中和試驗(yàn)（MSN）

    是一種改進(jìn)的血清中和方法，檢出率和病毒分離鑒定相當(dāng)，雖然此法用起來比較便捷，但是試驗(yàn)本身的耗時(shí)較長，不適合大量的樣品檢測(cè)。

1.2乳膠凝集試驗(yàn)（LAT）

    LAT 是以乳膠顆粒作為載體的一種間接凝集試驗(yàn)，即吸附可溶性抗原于其表面，特異性抗體與之結(jié)合后，可產(chǎn)生凝集反應(yīng)，本方法降低了檢驗(yàn)成本和勞動(dòng)強(qiáng)度，有較高的特異性，可以在臨床中應(yīng)用于血清篩選或早期感染診斷，具有高效的優(yōu)點(diǎn)。LAT 已成為新興的一種免疫性診斷方法，將越來越多的用于病毒診斷中。具有廣闊前景和推廣價(jià)值。 宋春陽等人對(duì)山東 7 個(gè)豬場(chǎng)共一百多份血清用偽狂犬乳膠凝集診斷試劑盒進(jìn)行血清學(xué)調(diào)查，血清陽性率達(dá) 25%。

    牛春玲等分別應(yīng)用 LAT、瓊脂免疫擴(kuò)散試驗(yàn)（AGID）、血清中和試驗(yàn)（SN）3 種診斷方法對(duì) 45 份豬血清樣品進(jìn)行了 PRV 血清抗體檢測(cè)，以進(jìn)口試劑盒 ELISA 診斷方法為標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)這 3 種血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行了比較分析，結(jié)果表明 LAT、AGID 的可重復(fù)性均為 100％，SN 的準(zhǔn)確性、敏感性、特異性均最為理想，LAT 的敏感性較好，準(zhǔn)確性和特異性稍差，AGID 的準(zhǔn)確性、敏感性、特異性均較差。宋春陽等（2008）對(duì)山東 7 個(gè)豬場(chǎng)共 100 多份血清用偽狂犬乳膠凝集診斷試劑盒進(jìn)行血清學(xué)調(diào)查，發(fā)現(xiàn)血清陽性率達(dá) 25%。Corn 等（2010）用 LAT 對(duì)疑似 PR 發(fā)病豬的糞便進(jìn)行診斷檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)本方法便利性，更具實(shí)用性。但 LAT 方法由于不能對(duì)樣品病毒進(jìn)行定量而限制了臨床應(yīng)用性。

1.3 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）

    在血清學(xué)診斷方法中 ELISA 診斷 PRV 的方法越來越成熟，國內(nèi)外已經(jīng)出現(xiàn)了商品化的試劑盒，使此方法在 PRV 的檢測(cè)中已經(jīng)越來越廣。姜艷芬等用 gE-EL ISA 法對(duì)陜西省部分豬場(chǎng)的 187 份豬血清進(jìn)行了 PRV野毒感染檢測(cè)，結(jié)果顯示陜西省豬 PRV 野毒抗體平均陽性率為 28.76%，最高為 48.98%。朱鳳霞等應(yīng)用中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所生產(chǎn)的豬偽狂犬病 DOT-ELISA診斷試劑盒對(duì)河南省駐馬店市哺乳仔豬病進(jìn)行診斷。熊英等采集四川眉山一家大型豬場(chǎng)大量死亡的病豬的肝脾臟和淋巴結(jié)，通過瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、ELISA 和細(xì)菌培養(yǎng)等方法同時(shí)對(duì)病料作了血清和細(xì)菌培養(yǎng)鑒定檢測(cè)，確定為 PRV 和沙門氏桿菌混合感染。Serena 和 Maria Soledad 等針對(duì) PRV 的 gE 基因的結(jié)構(gòu)蛋白的免疫優(yōu)先抗原決定簇設(shè)計(jì)了 ELISA

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