李永義 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
當(dāng)禽畜受到感染、缺氧、饑餓、創(chuàng)傷、手術(shù)、疼痛、寒冷及精神緊張等應(yīng)激時，垂體釋放促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)增加，導(dǎo)致血中糖皮質(zhì)激素(GC)增多;同時，其他激素如生長激素、催乳素、胰高血糖素、血管緊張素及醛固酮的分泌也增加。長期以往，將造成禽畜死亡，給畜牧養(yǎng)殖戶帶來經(jīng)濟(jì)損失。本文著重探討茶多酚對氧化應(yīng)激仔豬的保護(hù)作用。
1對血液ACTH和GC的影響
促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)由下丘腦室旁核分泌以后進(jìn)入垂體門脈血液中，刺激腺垂體遠(yuǎn)側(cè)部ACTH的表達(dá)，ACTH隨著循環(huán)血流到達(dá)腎上腺刺激GC的表達(dá)和分泌，這些激素影響心血管、腎臟功能和代謝，并和神經(jīng)系統(tǒng)一起共同調(diào)節(jié)機(jī)體對環(huán)境的反應(yīng)，在應(yīng)激情況下，腎上腺皮質(zhì)快速分泌Gc，促進(jìn)糖代謝，為機(jī)體提供能量。同時，GC也通過GC受體(GR)介導(dǎo)來誘導(dǎo)免疫細(xì)胞凋亡、抑制其增殖、干擾細(xì)胞因子的生成和APC的特異性調(diào)節(jié)能力來活化和調(diào)節(jié)T細(xì)胞的發(fā)育，影響機(jī)體免疫功能，因此當(dāng)分泌的皮質(zhì)醇過高并達(dá)到藥理劑量時又會對機(jī)體產(chǎn)生免疫抑制的作用，如果HPA軸長期處于激活狀態(tài)時，血液中GC含量會過高，從而損傷機(jī)體的免疫功能。
本次研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，正常情況下飼糧添加SOOmg/kg或100Omg/kgTP對斷奶仔豬血液ACTH和GC濃度無顯著影響 (P>0.05)。注射Diquat誘導(dǎo)斷奶仔豬氧化應(yīng)激使仔豬血液中GC濃度提高14.86%(P(0.05)，ACTH提高12.93%(P)0.05)。同Diquat(+)/TP(O)組相比，Diquat(+)/TP(SOOmg/kg)組使血液中ACTH下降0.73%，GC下降2.29%(P)0.05)，Diquat(+)/TP(I000mg/kg)組使血液中ACTH下降6.61%，GC下降6.58%(P>0.05)。說明正常情況下TP對血液ACTH和GC濃度無影響，氧化應(yīng)激可以促進(jìn)垂體分泌ACTH使腎上腺皮質(zhì)GC的合成和分泌增加，加速體內(nèi)能量代謝，在氧化應(yīng)激狀態(tài)下添加TP可以降低應(yīng)激對HPA軸的影響，降低ACTH和GC的分泌使之趨于正常狀態(tài)。
2對肝臟、脾臟和淋巴結(jié)中NF-kB、Fos、Jun的影響
NF-kB是一種重要的細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子，它的活化與機(jī)體免疫有著密切的關(guān)系，參與了免疫細(xì)胞的發(fā)育過程、抗原遞呈、炎癥因子表達(dá)調(diào)節(jié)、激發(fā)細(xì)胞免疫和體液免疫等諸多方面的調(diào)節(jié)，在動物免疫和炎癥反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。在許多的轉(zhuǎn)錄因子中，認(rèn)為NF一kB與調(diào)節(jié)細(xì)胞的氧化還原狀態(tài)有關(guān)，氧化應(yīng)激激活NF一kB?；钚缘腘F一kB是p50/p65蛋白組成的二聚體，靜息狀態(tài)下，NF一kB是由兩個同源p50或者p50/p65異源二聚體與工KB家族結(jié)合，存在于細(xì)胞質(zhì)中，阻止了NF一kB的核定位以及與DNA的結(jié)合。
本次研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，正常情況下，飼糧添加SOOmg/kg和I000mg/kgTP對仔豬肝臟、脾臟和淋巴結(jié)中NF-kB的表達(dá)無顯著影響(P>0.05)，但呈下調(diào)趨勢。注射Diquat誘導(dǎo)氧化應(yīng)激使仔豬肝臟和脾臟中NF-kB極顯著升高(P<0.01)，淋巴結(jié)中NF-kB顯著升高(P<0.05)。氧化應(yīng)激狀態(tài)下，添加SOOmg/kgTP使仔豬肝臟、脾臟和淋巴結(jié)中NF-kB呈下調(diào)趨勢 (P>0.05)，添加100Omg/kgTP使仔豬肝臟和淋巴結(jié)中NF一kB顯著降低 (P<0.05)、脾臟中的NF-kB極顯著降低(P<0.01)。與試驗二的結(jié)果和MasudaM等在H891宮頸癌細(xì)胞和MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞及Guptas等在A43工表皮癌細(xì)胞上的研究結(jié)果一致，說明氧化應(yīng)激可以提高仔豬肝臟、脾臟和淋巴結(jié)中NF-kB的表達(dá)，使仔豬的免疫功能受到抑制，TP可以抑制氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的仔豬肝臟、脾臟和淋巴結(jié)中NF-kB的表達(dá)，從而緩解氧化應(yīng)激對仔豬免疫功能的抑制。
AP-1是由FoS蛋白和Jun蛋白組成的異源二聚體，在炎癥反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。因此，F(xiàn)。S蛋白和Jun蛋白的含量決定了AP-1的活性。AP-1與DNA結(jié)合后起到轉(zhuǎn)錄后修飾作用，參與調(diào)節(jié)細(xì)胞功能和凋亡程序，在氧化應(yīng)激的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中起重要作用。AP-1作為一種氧化還原反應(yīng)敏感的轉(zhuǎn)錄因子，可被超氧化物和HZo:激活。大量研究表明EGcG可以抑制AP-1活性。Andriamana一ijaona等和Ahmed等研究都發(fā)現(xiàn)，EGeG抑制了人軟骨瘤0A細(xì)胞中DNA與AP-1的結(jié)合。Yun等研究發(fā)現(xiàn)在RA病人的滑液膜成纖維細(xì)胞中，EGCG通過抑制AP-活性抑制了TNF。介導(dǎo)的MMPS的產(chǎn)生。
本次研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，正常情況下，飼糧添加SOOmg/kg和 1000mg/kgTP對仔豬肝臟、脾臟和淋巴結(jié)中Fos的表達(dá)無顯著影響(P>0.05)，但呈下調(diào)趨勢，添加500m留kgTP使肝臟中Jun的表達(dá)呈下調(diào)趨勢(P>0.05)、脾臟中Jun的表達(dá)顯著下降(P<0.05)、淋巴結(jié)中Jun的表達(dá)極顯著下降(P<0.01)，添加IO00m叭gTP使肝臟中Jun的表達(dá)顯著降低(P<0.05)、脾臟和淋巴結(jié)中Jun的表達(dá)極顯著下降(P<0.01)。注射diquat誘導(dǎo)氧化應(yīng)激使仔豬肝臟、脾臟和淋巴結(jié)中FoS和Jun的表達(dá)極顯著升高(P<0.01)。氧化應(yīng)激狀態(tài)下，添加50OI’ng/kgTP使仔豬肝臟和淋巴結(jié)中的Fo:呈下調(diào)趨勢(P>0.05)，脾臟中的Fo:顯著降低(P<0.05)，肝臟、脾臟和淋巴結(jié)中Jun的表達(dá)極顯著降低(P<0.01);添加I000mg/kgTP使仔豬脾臟和淋巴結(jié)中的Fos顯著下降(P<0.05)，肝臟中的Fos及肝臟、脾臟和淋巴結(jié)中的Jun極顯著降低(P<0.01)，這一結(jié)果說明氧化應(yīng)激導(dǎo)致仔豬肝臟、脾臟和淋巴結(jié)中Jun和FoS的表達(dá)增加，AP-1的活性升高，TP可以抑制氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的仔豬肝臟、脾臟和淋巴結(jié)中Jun和FOS的表達(dá)，從而緩解氧化應(yīng)激。
