周丹 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）病毒直徑約50一80nln，病毒粒子呈球形，是一種有囊膜的單股正股RNA病毒。病毒粒子大多數(shù)呈球形，內(nèi)有一個(gè)核衣殼，核心直徑25一35nm，呈20面立體對稱，內(nèi)含長約15kb單股線狀正鏈基因組RNA，外繞脂質(zhì)雙層膜，表面有小而不顯著的纖突。病毒理化特性研究表明:乙醚、氯仿等有機(jī)溶劑可使本病毒失活，脫氧膽酸鈉和Triton一X一100可使PRRSV失去感染力。這是因?yàn)镻RRSV的雙層脂質(zhì)囊膜結(jié)構(gòu)，造成其對脂溶劑和去垢劑敏感。
PRRSV對溫度極為敏感，在較熱的環(huán)境中不可能存活較長的時(shí)間，56℃45min、37℃48h病毒完全失去致病性;潮濕、低溫的環(huán)境有助于PRRSV存活，一20℃至一70℃時(shí)，PRRSV可長期保存，4℃可存活1個(gè)月。PRRSV對pH敏感，在6.5<PH<7，5的環(huán)境中穩(wěn)定，當(dāng)PH超過其適應(yīng)范圍，其感染力很快喪失。病毒凝集紅細(xì)胞試驗(yàn)表明:自然分離到的 PRRSV不凝集鵝、雞、豬、豚鼠、牛、馬、綿羊和人等大多數(shù)動(dòng)物的紅細(xì)胞，不具有血凝活性。但日本學(xué)者Jusa等報(bào)道:用乙醚和吐溫一80處理后，PRRSV具有血凝活性，并且PRRSV特異性抗血清可以抑制這種血凝活性，Hl抗體滴度與中和抗體滴度具有非常明顯的相關(guān)性。但是，其他學(xué)者按相同的方法進(jìn)行試驗(yàn)研究，未能得到相同結(jié)果，因此，PRRSV是否具有血凝活性需進(jìn)一步證實(shí)。
PRRSV有著嚴(yán)格的宿主范圍，豬肺泡巨噬細(xì)胞(PAMs)是其首選靶細(xì)胞，PRRSV最初用原代細(xì)胞豬肺泡巨噬細(xì)胞分離得到。早期的病毒培養(yǎng)特性研究認(rèn)為，PRRSV主要在肺泡巨噬細(xì)胞、肺血管內(nèi)皮巨噬細(xì)胞、外周血單核細(xì)胞等單核一巨噬細(xì)胞系統(tǒng)中才能生長增殖，后來研究證實(shí)公豬的翠丸細(xì)胞如精子細(xì)胞和精母細(xì)胞等也適合于PRRsv的生長繁殖。除了能在PAM體外培養(yǎng)外，僅能在有限的幾種細(xì)胞中生長增殖，如源于MA104猴腎細(xì)胞系的兩個(gè)細(xì)胞亞克隆eL2621和Mare一145，豬脾巨噬細(xì)胞，腦小膠質(zhì)細(xì)胞，近年來有人用HsZH細(xì)胞分離PRRSV，它是從Marc一145細(xì)胞中克隆出來的，但是比Marc一145細(xì)胞更敏感，更適應(yīng)于PRRsv的增值。一般來講，不同的PRRsv毒株其細(xì)胞敏感株也會(huì)存在部分差異，但大多數(shù)毒株對隊(duì)M均有很強(qiáng)的適應(yīng)性且病毒滴度高，PAM是PRRSV最重要的靶細(xì)胞，故早期研究者利用隊(duì)M分離野毒株，但由于制備隊(duì)M存在技術(shù)要求高，難度較大，方法比較煩瑣等問題，目前大多數(shù)研究者和疫苗生產(chǎn)企業(yè)利用Marc一145細(xì)胞來分離與培養(yǎng)PRRSV。
PAM是PRRSV病毒最重要的靶細(xì)胞，用PAM培養(yǎng)病毒，其增值速度較快，通常細(xì)胞病變出現(xiàn)較早，在感染后1一4天便能觀察到，但在CL2621和Marc一145上，病毒生長稍慢，細(xì)胞病變出現(xiàn)較晚(2一6天)，PRRSV在各種細(xì)胞上都呈殺細(xì)胞性復(fù)制，主要表現(xiàn)為細(xì)胞圓縮、聚集、鬃毛樣的細(xì)胞質(zhì)膜和顆粒形成，最后從培養(yǎng)瓶上崩解脫落。PRRSV的復(fù)制局限于細(xì)胞漿中進(jìn)行，成熟的病毒粒子在接毒后9一12h通過細(xì)胞的排粒作用而釋放。
有研究者發(fā)現(xiàn)，用PRRSV全基因體外轉(zhuǎn)錄的基因組轉(zhuǎn)染細(xì)胞時(shí)，PRRSV轉(zhuǎn)錄的基因組可以在BHK一21、Vero等幾種不能被病毒粒子感染的細(xì)胞系中增殖，因此可以推斷，病毒的細(xì)胞親嗜性很大程度上是由細(xì)胞表面的某種受體所決定的。Duan曾報(bào)道獲得了一種能識別巨噬細(xì)胞表面的單克隆抗體，這種210kDa的抗體蛋白與巨噬細(xì)胞發(fā)生特異性結(jié)合，而后便能成功阻止PRRSV感染被結(jié)合的巨噬細(xì)胞，研究者推測這種蛋白就是PRRSV的一種受體蛋白。
