周丹 四川農(nóng)業(yè)大學
提取細菌、病毒的特殊蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，用其中有免疫活性的片段制成的疫苗即為亞單位疫苗。這種方法生產(chǎn)的亞單位疫苗成本較高，因此各國專家利用基因重組技術(shù)研制PRRS亞單位疫苗。即使用DNA重組生物技術(shù)，把天然的或人工合成的遺傳物質(zhì)定向插入細菌、酵母菌或哺乳動物細胞中，使之充分表達，經(jīng)純化后制得疫苗。
用這種辦法生產(chǎn)的疫苗可僅包含幾種主要抗原決定簇，能避免許多無關(guān)抗原誘發(fā)抗體，從而減少疫苗的副反應(yīng)。Plana等L”湘各PRRsv西班牙分離株Olot/91的ORFZ一ORF7分別插入了桿狀病毒表達載體，結(jié)果ORFZ、ORF3、ORFS和ORF7基因在昆蟲細胞中得到了表達。
他又用純化的GPZ、GP3、GPS和N蛋白進行懷孕母豬的免疫保護試驗，結(jié)果重組GP3和GPS免疫組對強毒的保護率分別為68.4%和50.0%。另外，用ORF3和ORFS的表達產(chǎn)物共同免疫母豬，所產(chǎn)仔豬斷奶后血清抗PRRsv的抗體陰性，說明沒有病毒在體內(nèi)復(fù)制。
獸醫(yī)構(gòu)建了rAd一GP3和rAd一tGP3重組腺病毒，對GP3的免疫原性和作用機理進行了研究，結(jié)果表明GP3蛋白結(jié)構(gòu)中的前64個氨基酸能影響GP3結(jié)構(gòu)蛋白抗原的形態(tài)，同時證明GP3雖不能刺激中和抗體的產(chǎn)生，但可對仔豬提供保護。
目前有學者研發(fā)了PRRS靶標型亞單位疫苗。它只截取PRRsV病毒中和價困T)抗原決定部位，可以減少發(fā)生抗體依賴性免疫加強反應(yīng)或過敏性反應(yīng)，而且更重要的是它所誘發(fā)的中和抗體可以有效阻斷病毒的呼吸道初次感染途徑。
Bastos等用牛結(jié)核分枝桿菌表達了截短前30個堿基的 PRRSVORFS基因和全長的ORF6基因，利用表達產(chǎn)物制成疫苗免疫豬，30d后可以檢測到針對PRRSV的特異性抗體，60d后可以檢測到有3/4的豬產(chǎn)生了中和抗體，在免疫后第60d和90d淋巴細胞出現(xiàn)病毒特異性的IFN一Y反應(yīng)而且攻毒后病毒血癥持續(xù)期明顯縮短。
目前亞單位疫苗的不足之處主要表現(xiàn)在:免疫原性相對較低，因此將PRRsv幾種主要保護性抗原基因與細胞因子等免疫增強分子在昆蟲細胞中共表達，以此來提高其免疫效果已經(jīng)成為該領(lǐng)域的研究熱點。但以此辦法制備的亞單位疫苗不僅技術(shù)要求高，而且成本昂貴，因此難以在臨床推廣應(yīng)用。
