馬豐英 華中農業(yè)大學
咳嗽和氣喘是獸醫(yī)檢測發(fā)現(xiàn)的豬支原體肺炎的臨床主要癥狀，肺的尖、心、中間以及隔葉前緣音d檢可見肉樣或蝦肉樣實變。X射線可對隱性或疑似患豬作出診斷，有著重要價值。
1分離培養(yǎng)法
分離培養(yǎng)是證實感染該病原的有效方法，但豬肺炎支原體是最難分離和鑒定的病原體之一。其生長緩慢，對營養(yǎng)條件要求嚴格，常被豬鼻支原體掩蓋，藥物治療或康復豬很難分離。
1.1染色法
用姬姆薩或瑞氏染色進行鏡檢觀察時，可見環(huán)狀或電燈泡狀的豬肺炎支原體。鄭忠發(fā)等用改良的復紅染色法，可見著色鮮艷清晰，呈球狀、二極狀、車輪狀以及藕節(jié)狀等的菌體，菌體中的細絲著色深而粗。
1.2免疫印跡法
stiPkovitsL等用抗豬肺炎支原體p36蛋白的兔血清對16株不同來源的豬肺炎支原體進行檢測時，發(fā)現(xiàn) 36KD處均有很強反應。相同抗血清，抗原為47種不同來源的支原體屬或無膽支原體屬的蛋白質，卻不發(fā)生反應。
1.3核酸探針檢測
Ahrens等用355標記探針用于檢測豬、牛不同支原體，僅與豬肺炎支原體有著特異性反應。Futo等用32P標記與豬肺炎支原體rRNA互補的寡聚脫氧核營酸作DNA探針，其靈敏度是放射性同位素測定結果的10倍。Johansson等則用與豬肺炎支原體 165rRNA可變區(qū)互補的特異性寡聚核普酸作探針建立斑點雜交法。Stemke將豬肺炎支原體DNA酶切片段的重組產物作探針，敏感性好但特異性不強。KWon等用地高辛標記DNA探針，檢測結果易出現(xiàn)假陽性。
1.4 PCR技術
ArtiushinS等建立的檢測 16srRNA的PCR法具較強特異性和敏感性。StemkeGW等根據(jù) 16SrRNA設計引物，鑒別豬肺炎支原體與豬鼻支原體和絮狀支原體。 StemkeGW等建立可特異性檢測肺中豬肺炎支原體的套式PCR。 StarkKD等則用套式PCR，首次在試驗和野外條件下測出空氣中的豬肺炎支原體。CalsmigliaM等根據(jù)16srnNA設計兩套套式PCR引物，可從鼻拭子中檢測豬肺炎支原體。通過擴增豬肺炎支原體的p36和p46基因區(qū)分豬鼻支原體。于敏等根據(jù)16srRNA建立的PCR法特異且敏感。zeehF等建立的real一time PCR方法，可從活豬鼻拭子中檢出病原，特異性達100%。
