夏春梅 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
細(xì)胞組成的幾大類物質(zhì)都是ROS攻擊的對象,而脂類被人為是最敏感的分子且其以不飽和脂肪酸 (PUFAS)的形式廣泛存在于細(xì)胞質(zhì)膜中。當(dāng)PUFAs受到氧化攻擊時,就會啟動LPO級聯(lián)反應(yīng)。畜牧養(yǎng)殖類哺乳動物精子在有外源氧化劑存在時,極易失去能動性就是發(fā)生LPO的結(jié)果。也就是說,精子質(zhì)膜中豐富的PU隊S是其極易發(fā)生氧化應(yīng)激的原因。
然而,PUFAS的存在賦予膜流動性和柔韌性,使其便于參加受精過程相關(guān)的膜融合事宜。不幸地是,這些分子中所含的不飽和雙鍵使其對自由基相當(dāng)敏感,一旦導(dǎo)致LPO發(fā)生后,就會自動連鎖反應(yīng)最終導(dǎo)致膜丟失或者形態(tài)學(xué)完整性降低、細(xì)胞功能受損,以及精子運動性能降低甚至誘發(fā)精子凋亡。丙二醛(MDA)是脂質(zhì)過氧化的一個副產(chǎn)物,常被用于監(jiān)測精子過氧化程度的各種生化分析。
MDA的含量往往是通過硫代巴比妥酸(TBA)反應(yīng)法測定。脂類過氧化物在精子質(zhì)膜中自動產(chǎn)生后被有活性的磷脂酶A2釋放,它們會損傷DNA和降低存儲精子的受精能力。盡管過氧化物會使精子的功能和生育力降低,但是其對精子結(jié)合同源和異源透明帶的能力具有重要的加強作用。
檢測ROS最常用的方法是用發(fā)光氨誘導(dǎo)化學(xué)發(fā)光來測量ROS的生成速度。盡管這是一種動態(tài)的速度測量,但是也不能準(zhǔn)確的反映ROS對精子的損傷程度。后來發(fā)現(xiàn),檢測己經(jīng)生成的ROS量比檢測R仍的生成速度更能直接反映生理環(huán)境的氧化應(yīng)激程度。
如通過氮藍(lán)四哇或細(xì)胞色素c一Fe3+復(fù)合物的反應(yīng)測量細(xì)胞膜表面的ROS、用化學(xué)發(fā)光反應(yīng)檢測細(xì)胞膜內(nèi)/外Ros的量和利用順磁共振方法測細(xì)胞內(nèi)ROS等。順磁共振雖然靈敏而且能確定細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的ROS的類型,但其對操作技術(shù)的準(zhǔn)確性要求很高且儀器設(shè)備價格比較昂貴。
目前主要通過間接手段說明生物系統(tǒng)或細(xì)胞中氧化應(yīng)激的程度,主要是檢測細(xì)胞的過氧化程度。檢測精子過氧化程度的各種生化分析中常用丙二醛(MDA),它是脂質(zhì)過氧化的一個副產(chǎn)物。MDA的含量往往是通過硫代巴比妥酸(TBA)反應(yīng)法測定。
