崔成哲 延邊大學(xué)
嗜血支原體的易感動(dòng)物很多，包括多種哺乳動(dòng)物中的嚙齒類動(dòng)物和反芻獸等，是畜牧養(yǎng)殖中常見(jiàn)的疾病之一。以往學(xué)者在進(jìn)行嗜血支原體的感染性試驗(yàn)時(shí)，多采用血液涂片染色鏡檢和血液直接鏡檢，而由于各種嗜血支原體的形態(tài)十分相似，應(yīng)用這些方法根本無(wú)法區(qū)分出動(dòng)物所感染嗜血支原體的種屬，試驗(yàn)的準(zhǔn)確性不高。
應(yīng)用分子生物學(xué)手段，尤其是DNA測(cè)序分析，是近年來(lái)進(jìn)行病原診斷、鑒定、分類和研究種間近緣關(guān)系的常用方法。2006年于龍政〔叫根據(jù)GenBank中豬嗜血支原體 165rRNA基因序列設(shè)計(jì)了一對(duì)引物，并利用一該對(duì)特異引物建立了豬嗜血支原體病的PCR診斷方法。特異性和敏感性試驗(yàn)結(jié)果表明，該診斷序列不能擴(kuò)增出弓形蟲(chóng)、鏈球菌、沙門氏桿菌、大腸桿菌、多殺性巴氏桿菌DNA和豬瘟病毒cDNA;當(dāng)樣本中豬嗜血支原體DNA含量為 56.25飛小L時(shí)，仍可擴(kuò)增出清晰可辨的條帶。本研究除應(yīng)用傳統(tǒng)檢測(cè)法外，還應(yīng)用PCR方法成功地從感染東方香豬體內(nèi)擴(kuò)增出豬嗜血支原體基因片斷。結(jié)果表明，感染東方香豬體內(nèi)的嗜血支原體基因序列與感染所用的豬嗜血支原體基因序列大小一致，證明東方香豬感染的嗜血支原體為豬嗜血支原體，提高了試驗(yàn)的準(zhǔn)確性。
在應(yīng)用分子生物學(xué)方法檢測(cè)的同時(shí)，本研究還應(yīng)用F坦SA方法對(duì)感染東方香豬進(jìn)行豬嗜血支原體抗體檢測(cè)。結(jié)果表明，感染豬嗜血支原體的東方香豬均呈陽(yáng)性反應(yīng)。此外，通過(guò)對(duì)感染東方香豬進(jìn)行血液常規(guī)檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)東方香豬在感染豬嗜血支原體后，紅細(xì)胞數(shù)、淋巴細(xì)胞數(shù)、紅細(xì)胞比容及血紅蛋白均出現(xiàn)不同程度的降低，白細(xì)胞數(shù)顯著升高，這些變化均與豬嗜血支原體病相似;同時(shí)，低免疫力東方香豬相.繼表現(xiàn)出體溫升高，精神萎頓，食欲減退;可視粘膜蒼白、黃染，個(gè)別豬全身皮膚黃染;兩耳發(fā)給，耳尖干燥。四肢內(nèi)側(cè)、胸腹下有大小不同的出血點(diǎn)和紫斑;有不同程度的嘔吐、腹瀉，消瘦，生長(zhǎng)發(fā)育遲滯;體溫、呼吸率均有明顯變化，出現(xiàn)了豬嗜血支原體病典型臨床癥狀。
