鮑建昌 西北農(nóng)林科技大學(xué)
目前，盡管豬卵母細(xì)胞體外成熟能夠為科研活動提供部分原材料，但其成熟效率及胚胎發(fā)育的能力與體內(nèi)成熟的卵母細(xì)胞相比較差。并且其用于畜牧生產(chǎn)時，效率低下。在一定程度上，可能是因為體外成熟的卵母細(xì)胞胞質(zhì)的發(fā)育的不夠完善。 如果能夠提高豬卵母細(xì)胞體外成熟的質(zhì)量不僅能為基礎(chǔ)研究提供高質(zhì)量的原材料，還能為畜牧生產(chǎn)提供良好的供體卵母細(xì)胞，從而提高克隆動物的生產(chǎn)效率，為保護(hù)稀有和瀕臨滅絕的物種提供一種有效的保護(hù)途徑。
伴隨著核移植效率的提高，轉(zhuǎn)基因動物的生產(chǎn)效率也會大幅度提高，這也為生物反應(yīng)器等生產(chǎn)實踐相關(guān)的技術(shù)的實現(xiàn)提供了保障。還為生產(chǎn)疾病模式動物提供了有效的方法，為研究人類疾病提供必要的模型。并且為人類器官移植提供充足的供體器官。這一系列技術(shù)效率的提高都依賴與卵母細(xì)胞質(zhì)量的提高，因此優(yōu)化豬卵母細(xì)胞體外成熟培養(yǎng)體系，提高卵母細(xì)胞質(zhì)量有著重大的意義。
目前豬卵母細(xì)胞體內(nèi)成熟的發(fā)育能力明顯要優(yōu)于體外成熟的卵母細(xì)胞細(xì)胞，體內(nèi)發(fā)育的卵母細(xì)胞，無論從體外受精能力，以及 NT 胚胎發(fā)育能力，以及發(fā)育后囊胚內(nèi)細(xì)胞數(shù)都優(yōu)于體外成熟的卵母細(xì)胞，這都說明，目前豬卵母細(xì)胞的體外成熟培養(yǎng)體系還存在一定的問題。其中最主要的問題是，體外成熟卵母細(xì)胞體的質(zhì)量不高，發(fā)育能力較差。分析其原因，可能是因為，豬卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)時，核質(zhì)發(fā)育不同步造成的。研究表明體內(nèi)成熟的卵母細(xì)胞由于在前期被卵泡液中的 GVBD 抑制因子抑制，卵母細(xì)胞能自發(fā)地恢復(fù)減數(shù)分裂，長時間停滯于 GV 期，隨著卵母細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)的蛋白因子的轉(zhuǎn)錄翻譯，其才逐步恢復(fù)減數(shù)分裂能力，進(jìn)入減數(shù)分裂，完成卵母細(xì)胞胞質(zhì)及核的完全成熟。
而目前，大型家畜如豬、牛、羊等用于實驗研究及胚胎工程等的卵母細(xì)胞主要來自體外成熟培養(yǎng)。由于未成熟的卵母細(xì)胞離開卵泡后，其受卵泡液中的抑制因子的影響也就隨之解除。以至于其胞質(zhì)未發(fā)育好的情況下和恢復(fù)減數(shù)分裂，導(dǎo)致在體外培養(yǎng)時卵母細(xì)胞的核成熟速度加快，導(dǎo)致在核成熟時，胞質(zhì)的成熟并未完成，造成卵母細(xì)胞的細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)的成熟不同步，這樣就會造成卵母細(xì)胞體外成熟的質(zhì)量不高及其后期胚胎發(fā)育能力低下。因此，在體外造就一個與體內(nèi)相似的抑制環(huán)境，使未成熟的卵母細(xì)胞長期處于 GV 期，使之有充分的時間來準(zhǔn)備成熟所需物質(zhì)，來完成相應(yīng)的成熟，同時也給細(xì)胞質(zhì)成熟提供了足夠的時間，能夠提高卵母細(xì)胞的成熟質(zhì)量以及其后期發(fā)育能力。
造成核質(zhì)不同步的原因可能不僅如此，還可能是體外成熟培養(yǎng)過程中激素添加造成的，也可能是體外培養(yǎng)環(huán)境造成的，還有可能是卵母細(xì)胞體外成熟培養(yǎng)也造成的，總之，由于豬卵母細(xì)胞體外成熟培養(yǎng)體系與體內(nèi)還有差別造成了體外成熟的卵母細(xì)胞質(zhì)量較差，因此優(yōu)化體外培養(yǎng)體系迫在眉睫。
