鮑建昌 西北農(nóng)林科技大學(xué)
在 IVM 過程中添加抑制劑能夠提高卵母細(xì)胞的質(zhì)量及胚胎的發(fā)育能力，但也有畜牧研究人員指出，抑制劑的添加并不影響卵母細(xì)胞的成熟，甚至對卵母細(xì)胞的成熟有副作用，能顯著降低卵母細(xì)胞成熟的質(zhì)量及胚胎發(fā)育能力。
造成這種結(jié)果的因素很多，很可能抑制劑的添加量和抑制劑的作用機(jī)理不甚明了有關(guān)。在體內(nèi)發(fā)育過程中，卵母細(xì)胞的成熟受到很多復(fù)雜的調(diào)控影響才具備發(fā)育成健康個體的能力，其中很多調(diào)控機(jī)制我們還不了解，僅僅靠添加某一種抑制劑很難實(shí)現(xiàn)與體內(nèi)發(fā)育相同的結(jié)果。并且，目前我們還不能完全模擬卵母細(xì)胞體內(nèi)成熟所處的環(huán)境，體外培養(yǎng)環(huán)境也可能是造成卵母細(xì)胞成熟質(zhì)量的原因。
由于卵母細(xì)胞體內(nèi)成熟的調(diào)控機(jī)制錯綜復(fù)雜，其 GVBD 等的發(fā)生不僅僅靠一種或少數(shù)幾種因子調(diào)控。并且某些抑制劑的作用靶點(diǎn)及詳細(xì)的作用機(jī)理不甚明了，因此盲目地使用一些抑制劑可能會抑制卵母細(xì)胞成熟的一些必須通路，導(dǎo)致級聯(lián)反應(yīng)造成非預(yù)期的抑制損害。因此，抑制劑的選擇也是成熟抑制過程中存在的一個問題。并且，卵母細(xì)胞體內(nèi)發(fā)育可能受多種抑制劑作用，所以，在體外培養(yǎng)過程中，多種抑制劑的聯(lián)合使用或許能起到較好的抑制作用。抑制劑的組合使用也是一個需研究的問題。
抑制劑的添加量是目前抑制劑使用的一個問題，低濃度的抑制劑對卵母細(xì)胞的成熟抑制沒有顯著影響，但高濃度的抑制劑可能導(dǎo)致大量的卵母細(xì)胞退化死亡。因此篩選出一個合適的濃度來作用于卵母細(xì)胞體外成熟是目前存在的一個問題。抑制劑的添加時間，添加方式的選擇也影響著卵母細(xì)胞成熟的質(zhì)量及胚胎發(fā)育的能力。目前，豬卵母細(xì)胞體外成熟時抑制劑的添加時間多為 20h 左右，然后撤去再培養(yǎng) 24～36h。這主要是根據(jù)，卵母細(xì)胞在體外發(fā)育時 GVBD 發(fā)生的時間來確定的。但是目前獲得的 GVBD 發(fā)生的時間是根據(jù)體外成熟培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)獲得的，并不是體內(nèi)發(fā)與卵母細(xì)胞真實(shí)的時間。因此確定合適的抑制時間，也是提高抑制劑效率的關(guān)鍵。
豬卵母細(xì)胞體外成熟抑制劑的使用還存在很多問題，需要進(jìn)行進(jìn)一步的研究，來深入了解卵母細(xì)胞成熟機(jī)理和抑制劑的作用機(jī)理，提高體外成熟卵母細(xì)胞的質(zhì)量。
