劉海濤 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
1種類
迄今為止，人們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在豬、牛、綿羊、山羊、馬、兔、犬、貓、猴、駱駝、羊駝、狐類、驢、鹿、角馬、駱馬等哺乳動物和鳥類及人體中感染附紅細(xì)胞體的病例。根據(jù)畜牧研究人員先后報道的已發(fā)現(xiàn)并命名的附紅細(xì)胞體主要有：豬附紅細(xì)胞體 (豬)、小附紅細(xì)胞體 (豬)、球狀附紅細(xì)胞體 (鼠)、異形附紅細(xì)胞體 (鼠)、溫氏附紅細(xì)胞體 (牛)、綿羊附紅細(xì)胞體、山羊附紅細(xì)胞體、兔附紅細(xì)胞體、犬附紅細(xì)胞體、貓附紅細(xì)胞體、微小附紅細(xì)胞體、狐附紅細(xì)胞體、雞附紅細(xì)胞體、和人附紅細(xì)胞體等。一些附紅細(xì)胞體并不具有嚴(yán)格的宿主特異性，例如綿羊附紅細(xì)胞體也可感染山羊，現(xiàn)已證實(shí)，豬的小附紅細(xì)胞體是豬附紅細(xì)胞體的前體或未成熟階段，兩者是同一個種。
2形態(tài)特征及染色特性
附紅細(xì)胞體是一種血液寄生的，大小不一，缺乏細(xì)胞壁的多形態(tài)微生物，不同種類的附紅細(xì)胞體在形態(tài)學(xué)上往往缺乏明顯的鑒別特征。附紅細(xì)胞體隨其寄生宿主的不同以及在同一宿主中不同的生長階段，其形態(tài)差異極為顯著。常見的形態(tài)多樣，有桿狀、球桿狀、環(huán)狀、圓形、卵圓形、啞鈴型和網(wǎng)球拍形等。張富梅等對牛血液懸滴鏡檢，發(fā)現(xiàn)被感染的紅細(xì)胞發(fā)生變形，呈車輪或菠蘿狀，紅細(xì)胞上有許多蟲體附著，牛溫氏附紅細(xì)胞體呈圓形、橢圓形、月牙形或桿狀，有時可見幾個蟲體結(jié)成團(tuán)塊，且附紅細(xì)胞體具有遮光性，血漿中的蟲體具有運(yùn)動性，可上下翻滾、前后移動，附著在紅細(xì)胞體上的蟲體似乎無運(yùn)動性，但實(shí)際上能使紅細(xì)胞發(fā)生震顫。有的附紅細(xì)胞體寄生于紅細(xì)胞的凹盤處,其附紅細(xì)胞體和紅細(xì)胞表面之間大概有 15~25 nm 的間隙。附紅體通過此空間粘附于紅細(xì)胞表面。Adam 等發(fā)現(xiàn)，在電鏡下附紅細(xì)胞體無壁無核無細(xì)胞器，只有單層限制性單位膜包裹，在胞漿內(nèi)可見低密度的類似核糖體顆粒物質(zhì)和精細(xì)的絲狀結(jié)構(gòu)，此外在胞漿內(nèi)還可見電子半透明區(qū)域。
馮立明等在一個紅細(xì)胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)有成百上千個附紅細(xì)胞體。最近的研究發(fā)現(xiàn)附紅細(xì)胞體不僅可以附著紅細(xì)胞表面，而且還可以進(jìn)入紅細(xì)胞內(nèi)部 。Zachary 和 Liebich 等，在電鏡下發(fā)現(xiàn)了豬附紅細(xì)胞體的三個不同發(fā)展階段，即球形的未成熟的附紅小體、盤形的幼年的附紅體和環(huán)形的成熟的附紅細(xì)胞體?，F(xiàn)己證實(shí)，豬的小附紅細(xì)胞體是豬附紅細(xì)胞體的前體或未成熟階段，兩者是同一個種。最近一些學(xué)者研究認(rèn)為附紅細(xì)胞體可能含有 RNA 和 DNA。
附紅細(xì)胞體對苯胺色素易于著染，張和平對豬附紅細(xì)胞體進(jìn)行染色，然后油鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)附紅細(xì)胞體姬姆薩染色呈淡紫色，瑞氏染色呈紫藍(lán)色。吖啶橙染色為典型的黃綠色熒光，對碘不著色。在油鏡下，調(diào)節(jié)微調(diào)螺旋時折光性較強(qiáng)，附紅細(xì)胞體中央發(fā)亮，形似空泡。
3 分布及增殖方式
附紅細(xì)胞體在紅細(xì)胞表面及內(nèi)部都有存在，也有的游離在血漿中。一條茂等發(fā)現(xiàn)，人工感染的綿羊的骨髓中存在有附紅細(xì)胞體，馮立明、裴標(biāo)等也曾在病人的骨髓中發(fā)現(xiàn)大量附紅細(xì)胞體，而且在血液中增加之前，骨髓中已顯著增多。因此研究者認(rèn)為附紅細(xì)胞體增殖部位可能主要在骨髓。
對于附紅細(xì)胞體的增殖方式至今尚不十分清楚，Keetoon等曾發(fā)現(xiàn)附紅細(xì)胞體是以二裂方式增殖；Zachary等發(fā)現(xiàn)附紅細(xì)胞體是以出芽方式進(jìn)行復(fù)制的。中國的馮立明和許耀成分別發(fā)現(xiàn)，附紅細(xì)胞體是以裂解增殖的方式進(jìn)行增殖的。
4 培養(yǎng)特性
目前，由于附紅細(xì)胞體在宿主紅細(xì)胞上以直接分裂或出芽的方式進(jìn)行增殖，所以還沒有發(fā)現(xiàn)體外培養(yǎng)附紅細(xì)胞體的最佳方式。Smith對豬附紅細(xì)胞體進(jìn)行了體外培養(yǎng)。Nonaka等對豬附紅細(xì)胞體在厭氧環(huán)境下，用 rEM 培養(yǎng)液加入10%犢牛血清并加入肌酐可連續(xù)培養(yǎng) 72h。張守發(fā)等用分別含 40%的犢牛血清的 RPMI-1640、D-MEM、M-199 三種培養(yǎng)基，37℃下培養(yǎng)牛附紅細(xì)胞體，在RPMI-1640 培養(yǎng)基中,每 12h 更換 1 次培養(yǎng)液，并補(bǔ)充適量正常紅細(xì)胞，可連續(xù)傳代培養(yǎng)可達(dá) 44 代以上。楊世錦，用人和豬等 8 種動物的紅細(xì)胞加入 RPMI-1640培養(yǎng)液中培養(yǎng)豬附紅細(xì)胞體，發(fā)現(xiàn)豬附紅細(xì)胞體對人、豬、兔、小白鼠、綿羊、山羊、黃牛、犬、雞的紅細(xì)胞皆有感染性，其中豬紅細(xì)胞可傳代培養(yǎng) 36 代；山羊和黃牛可傳 24 代；小白鼠可傳 18 代；兔可傳 9 代；人、犬的紅細(xì)胞可傳 7 代；綿羊、雞紅細(xì)胞可傳 3 代。目前附紅細(xì)胞體的體外培養(yǎng)條件比較苛刻，如果想要進(jìn)一步進(jìn)行附紅細(xì)胞體的研究工作，對于其體外培養(yǎng)條件仍然需要進(jìn)一步改進(jìn)。
5 生物活性
附紅細(xì)胞體病原對化學(xué)藥品及干燥環(huán)境抵抗力較弱，對溫度較敏感。將附紅細(xì)胞體滴于載玻片上，自然干燥 1min，復(fù)溶，只有極少部分還具有很弱的活動能力，自然干燥 2mins，復(fù)溶，幾乎全部停止活動。一般消毒幾分鐘即可將其殺死，在含氯消毒劑中 1min 中即可全部滅活，在含碘消毒劑中很快失去活性，停止運(yùn)動，而在酸性溶液里其活性會增強(qiáng)。杜海霞研究發(fā)現(xiàn)，附紅細(xì)胞體在 3%-5%甲酚皂溶液中，5min 即可失活，3%-5%石碳酸溶液中 4-6h 死亡。在 3%苛性鈉溶液中18-24h，較大個體被殺死，小球性的仍然能夠運(yùn)動。0.1%新潔爾滅中 24h，附紅細(xì)胞體仍能活潑運(yùn)動。附紅細(xì)胞體在 75℃-100℃水浴中作用 1min，即失去活性停止運(yùn)動，對低溫抵抗力較強(qiáng)，0℃-4℃環(huán)境可存活 60d，并具有感染力，90天仍有約 30%的附紅細(xì)胞體具有活性。
