熊俊 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
豬輪狀病毒在外界環(huán)境中非常穩(wěn)定，對(duì)溫度抵抗力較強(qiáng)，在20℃環(huán)境中7個(gè)月依然具有感染力反復(fù)凍融、在-20℃環(huán)境中能長(zhǎng)期保存。輪狀病毒對(duì)于理化處理也具有較強(qiáng)抵抗力超聲波處理、氯仿處理、乙醚處理均不失活，酸堿處理在pH值3.5-10.0范圍內(nèi)依然具有感染力。經(jīng)胰蛋白酶處理能增強(qiáng)RV感染力，而氯、碘等可滅活RV。
成熟的病毒顆粒在電鏡下呈球形，表面光滑，無(wú)囊膜，直徑65-75nm，十二面體，電鏡下觀察為帶輻條的車輪狀結(jié)構(gòu)。輪狀病毒顆粒由同心3層結(jié)構(gòu)組成:核心、內(nèi)衣殼和外衣殼?；蚪M大小約為19kb，由11個(gè)不連續(xù)節(jié)段(Segment)的雙鏈RNA組成，各片段大小不等。最里面一層結(jié)構(gòu)主要由vPZ構(gòu)成，包裹著病毒基因組、vPI和VP3，它們共同組成了病毒的核心。v6包裹在VPZ外，組成病毒粒子內(nèi)衣殼。外衣殼由兩種蛋白組成，分別是VP4和VP7。病毒的光滑表面由260個(gè)VP7的三聚體構(gòu)成，光滑表面的釘狀突起結(jié)構(gòu)由60個(gè)vP4的二聚體構(gòu)成。vP4在細(xì)胞生長(zhǎng)周期中具有基本的功能，包括受體結(jié)合與細(xì)胞穿透。胰蛋白酶處理病毒粒子后，VP4蛋白將被胰蛋白酶在特異切割位點(diǎn)切割為兩部分，即為vPS和vPS。vP7為糖蛋白，占病毒蛋白總量的30%，是誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生特異性中和抗體的最主要抗原。VP7基因包含一個(gè)編碼326位氨基酸序列的開(kāi)放閱讀框，這個(gè)開(kāi)放閱讀框編碼蛋白的N端具有兩個(gè)疏水性序列:H1(1-29aa)和H2(30-50aa)，它們均作為獨(dú)立的信號(hào)膚參與蛋白定位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。HZ序列單獨(dú)的作用己經(jīng)足以將蛋白定位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上，其信號(hào)膚切割位點(diǎn)在Ala一50與Gln-51之間。vP7作為鈣結(jié)合蛋白，在輪狀病毒最初附著細(xì)胞階段與細(xì)胞受體相互作用有關(guān)。非結(jié)構(gòu)蛋白NsP4為病毒一種跨內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜糖蛋白，具有多種功能，在病毒的形態(tài)發(fā)生和致病機(jī)理中起著重要的作用。NsP4是最早發(fā)現(xiàn)的一種病毒腸毒素，能夠引起新生小鼠的腹瀉，而在組織學(xué)上無(wú)病變發(fā)生。有研究發(fā)現(xiàn)該蛋白能刺激有效的免疫反應(yīng)，因此其編碼基因可以作為輪狀病毒疫苗發(fā)展的候選基因。NSP4第 112-175氨基酸殘基于輪狀病毒接種細(xì)胞后的細(xì)胞培養(yǎng)液上清中被發(fā)現(xiàn)，在體外試驗(yàn)中具有活化caZ+的能力，體內(nèi)試驗(yàn)中能夠誘導(dǎo)與劑量及年齡相關(guān)的腹瀉，與全長(zhǎng)蛋白具有相同的性質(zhì)。
RV有三種特異性抗原，分別為群抗原、中和抗原及血凝抗原。群抗原由內(nèi)衣殼蛋白vP6決定，是各種動(dòng)物與人的輪狀病毒具有的共同抗原，可使用補(bǔ)體結(jié)合、免疫擴(kuò)散、免疫熒光免疫電鏡試驗(yàn)進(jìn)行病毒的鑒定。中和抗原主要是由外殼糖蛋白VP7決定。血凝素抗原是由外殼蛋白VP4決定，但不是所有的輪狀病毒都有血凝素。
