熊俊 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
目前獸醫(yī)應(yīng)用中的豬輪狀病毒疫苗主要有兩種類(lèi)型:細(xì)胞滅活苗和弱毒苗，接種方式為口服或肌肉注射。Mark報(bào)道了弱毒苗與滅活苗的比較試驗(yàn)，結(jié)果表明接種弱毒苗能有效阻止發(fā)病和排毒，攻毒保護(hù)率達(dá)95%，而滅活苗不能夠提供有效的保護(hù)力。所以目前預(yù)防豬輪狀病毒感染主要以弱毒苗為主。國(guó)內(nèi)豬輪狀病毒疫苗的研發(fā)力度不夠，而我國(guó)豬輪狀病毒的感染率又非常高，因此國(guó)內(nèi)需加快豬輪狀病毒的研發(fā)進(jìn)程。國(guó)內(nèi)己有哈爾濱獸醫(yī)研究所研制生產(chǎn)的豬傳染性胃腸炎一輪狀病毒二聯(lián)弱毒苗和福建省生物藥品廠(chǎng)同中國(guó)農(nóng)大聯(lián)合開(kāi)發(fā)的TGE一PED-RV三聯(lián)弱毒苗。
1傳統(tǒng)疫苗
人們?cè)缙谥谱鲉蝺r(jià)減毒口服活疫苗，使用動(dòng)物輪狀病毒毒株如牛輪狀病毒RIT4237、恒河猴MMU18006、牛WC3等。它們的免疫持續(xù)時(shí)間較滅活疫苗長(zhǎng)，但保護(hù)力不穩(wěn)定，在發(fā)達(dá)國(guó)家獲得較滿(mǎn)意保護(hù)率，而在發(fā)展中國(guó)家未能獲得滿(mǎn)意保護(hù)率。這種差異可能是因?yàn)榱餍兄甑难逍筒煌?，交叉保護(hù)力差，或者因?yàn)樗拗鞑町惒荒芗ぐl(fā)保護(hù)。
2亞單位疫苗
亞單位疫苗是指利用病原體能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗體的一種或幾種有效成份，制成不含遺傳物質(zhì)的疫苗。大多數(shù)RV亞單位疫苗的研究大多是表達(dá)RV的抗原相關(guān)蛋白的基因，制備抗原蛋白。輪狀病毒樣顆 粒(rvLP)是輪狀病毒基因表達(dá)后的結(jié)構(gòu)蛋白自我組裝成病毒顆粒狀物質(zhì)。rVLP單獨(dú)使用或作為候選疫苗的一部分均具有免疫原性，動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)己證實(shí)了rVLP的免疫原性、保護(hù)力以及作為候選疫苗的潛在用途。Conner等采用重組桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)牛輪狀病毒RF株的vPZ、猴輪狀病毒SAll株vP4、vP6、vP7，表達(dá)產(chǎn)物自動(dòng)組裝成病毒樣顆粒(vLP)，用vPZ/4/627或vPZ/6/7周LP免疫均可產(chǎn)生特異的較高滴度血清抗體IgG，能保護(hù)同型(G3)輪狀病毒的攻擊，顯示了VLPs良好的免疫原性和保護(hù)作用，展示出輪狀病毒VLP作為亞單位疫苗具有很好的應(yīng)用前景。
3.DNA疫苗
DNA疫苗是利用基因重組技術(shù)將一種或幾種目的基因重組到質(zhì)粒載體上，再注入宿主體內(nèi)使之表達(dá)，從而激發(fā)免疫。輪狀病毒的DNA疫苗研究主要集中于VP4、vP7、vP6以及NsP4基因上。Herrmann等將輪狀病毒vP4、vP6、vP7基因插入表達(dá)質(zhì)粒pCMV作為DNA疫苗，并用基因槍射入小鼠皮下，產(chǎn)生了病毒特異性血清抗體和細(xì)胞毒性T細(xì)胞，結(jié)果顯示對(duì)同型的輪狀病毒感染有一定的保護(hù)作用。張彩紅等130峙勾建GZ和G3型vP7基因的重組腺病毒經(jīng)滴鼻和灌胃兩種途徑免疫小鼠后，均誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生了較強(qiáng)的輪狀病毒特異性免疫反應(yīng)，產(chǎn)生了中和抗體。vP4蛋白在蛋白酶的作用下，裂解為VPS和VPS。研究發(fā)現(xiàn)VPS同全長(zhǎng)的VP4片段一樣，能刺激機(jī)體產(chǎn)生中和抗體，免疫原性較vPS更優(yōu)。研究顯示多功能非結(jié)構(gòu)蛋白NsP4編碼基因也可以作為輪狀病毒疫苗的候選基因。Johansen等研究證實(shí)NsP4能引發(fā)機(jī)體的體液免疫和細(xì)胞免疫，特別是促進(jìn)具有細(xì)胞毒性的T細(xì)胞亞群的增殖。Yuan、Rodrignez等也發(fā)現(xiàn)了針對(duì)NsP4的保護(hù)性抗體。因此，NsP4免疫的相關(guān)研究為輪狀病毒DNA疫苗的研究提供了新的途徑。
