曹齊樹 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
1. JEV的基因結(jié)構(gòu)
獸醫(yī)研究發(fā)現(xiàn)豬源乙型腦炎（JEV）是單股正鏈的RNA病毒，全長基因組約為llkb。其基因組主要由5’非編碼區(qū)，結(jié)構(gòu)蛋白編碼區(qū)(C，prM/M，E)，非結(jié)構(gòu)蛋白編碼區(qū)困51，NsZA，NsZB，Ns3，NS4A，NS4B，Nss)和3’非編碼區(qū)四個(gè)部分組成。
在 JEVRNA鏈的5’末端有一個(gè)m7GPpAmp的I型帽，一般情況下帽狀結(jié)構(gòu)可以增強(qiáng)RNA的感染性，且能保護(hù)RNAS’端不受一些酶類的降解，并促使翻譯的起始);其末端沒有PolyA，為CU一OH。3’端具有一段十分保守的能夠形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)的核酸序列，這個(gè)發(fā)夾結(jié)構(gòu)在病毒RNA的復(fù)制和包裝過程中可能起到重要的作用。該RNA鏈只有一條完整的開放編碼框，能夠編碼3432個(gè)aa(氨基酸)。
2. JEV的蛋白質(zhì)
A、結(jié)構(gòu)蛋白
C蛋白:C蛋白分子量約為14KI)，由127個(gè)aa(氨基酸)組成。C蛋白是JEV的衣殼蛋白，氨基酸中大部分是堿性的，帶正電荷的Lys和A咫殘基含量最高約為23%一25%，而在形成病毒衣殼時(shí)這些正電荷可與病毒基因組RNA相互作用結(jié)合成核心。C蛋白的主要作用是保護(hù)基因組使其免受核酸酶等因素的破壞。
PrNfM蛋白:為JEV的膜蛋白，prM蛋白是M蛋白的前體，M蛋白可以形成犯v的囊膜。有研究認(rèn)為在犯V誘發(fā)免疫保護(hù)時(shí)prM蛋白起到了重要的協(xié)同作用?？筂蛋白的抗體對(duì)JEV也有輕度的中和作用，所以M蛋白與JEV的感染也有關(guān)系。
E蛋白:E蛋白是疏水性蛋白，是兀v的主要囊膜蛋白，也是JEV最重要的蛋白之一。E蛋白分子量為53KD，有500個(gè)aa殘基，其中甘氨酸和丙氨酸的含量最高。E蛋白只有一個(gè)糖基化位點(diǎn) (Asnl54一X一Ser)，此位點(diǎn)在大多數(shù)黃病毒科均比較保守。E蛋白與JEV毒力有關(guān)，某些關(guān)鍵氨基酸的改變會(huì)嚴(yán)重影響犯V的神經(jīng)毒力和神經(jīng)侵襲力。E蛋白有很多功能，病毒的毒力、入侵機(jī)制等都和E蛋白有關(guān)。另外最重要的是E蛋白可以作為疫苗的研制材料，因?yàn)樗軌虼碳C(jī)體產(chǎn)生中和抗體。
另外研究表明E蛋白含有3個(gè)域:域I(也叫中心域)，域n和域m。其中域I存在E蛋白僅有的一個(gè)糖基化位點(diǎn)，并且有血情學(xué)及生物學(xué)活性的抗原表位;域n和域m都存在很多抗原中和表位，并且域m可以參與細(xì)胞受體結(jié)合。另外域nl中有黃病毒科所特有的保守序列即399~RGD一401序列，它可能在參與受體結(jié)合過程中起到關(guān)鍵作用。另外研究表明域m不僅是JEV的一個(gè)重要結(jié)構(gòu)域，也是MVEV(墨累山谷腦炎病毒)、TBEV(蟬虱腦炎病毒)和LIV(跳躍病毒)等病毒的重要結(jié)構(gòu)域。研究表明JEVE蛋白域m的中和位點(diǎn)主要集中在E337一345、E377一382、E397一403這3個(gè)區(qū)域內(nèi)。而此區(qū)域的變異可能會(huì)影響抗原與中和抗體的反應(yīng)，因此可以根據(jù)此區(qū)域的變異情況來判斷現(xiàn)行的基因111型JEV疫苗能否有效地保護(hù)其它基因型JEV入侵動(dòng)物體。
B、非結(jié)構(gòu)蛋白
非結(jié)構(gòu)蛋白緊接E蛋白之后，主要包括NSI、NSZA、NSZB、NS3、NS4A、NS4B和NSS。Nsl蛋白分子量約為40KD，常以二聚體形式存在，是一種分泌型的糖蛋白，可能參與病毒復(fù)制的早期階段。另外，Nsl也可作為亞單位疫苗研制的材料。NSZ戶了B蛋白在Nsl蛋白的加工過程起重要作用，而NsZB和Ns3所構(gòu)成的復(fù)合體是黃病毒的蛋白酶，主要作對(duì)大部分非結(jié)構(gòu)蛋白進(jìn)行切割加工。NS3蛋白分子量為64KD，具有親水性基團(tuán)，是一個(gè)多功能蛋白，具有激酶和解旋酶的特性。研究表明，NS3蛋白對(duì) JEVRNA的復(fù)制有重要作用。NS4戶JB兩種蛋白分子量為28KD和14KD，都是疏水蛋白，可能與膜結(jié)構(gòu)有關(guān)。NSS蛋白分子量為105KD，是黃病毒中最大的保守蛋白，與病毒的復(fù)制有密切關(guān)系。
