冷超糧 中國農(nóng)業(yè)科學院
高致病性豬繁殖與呼吸綜合癥病毒（PRRSV）的GP5 蛋白 由 ORF5 編碼的一種糖基化蛋白。它是病毒基因組上變異最大的結(jié)構(gòu)蛋白之一。畜牧人才研究表明，GP5 蛋白能夠誘導產(chǎn)生中和抗體，被認為是機體的主要保護性抗原。表達 GP5 蛋白的基因工程疫苗免疫豬后能夠誘導產(chǎn)生抗 PRRSV 的中和抗體，在隨后的 PRRSV 強毒攻擊中，這些中和抗體能夠提供部分保護。此外，免疫小鼠制備的部分抗 GP5 蛋白的單克隆抗體也具有中和活性。GP5 蛋白有 3 個半胱氨酸殘基，突變其中任何一個都能夠完全阻止病毒的組裝。在天然病毒粒子中，GP5 和 M 蛋白通過二硫鍵形成異源二聚體，參與病毒的感染與復制。M 蛋白 由 ORF6 編碼的 III 型膜蛋白。它是一種非糖基化的蛋白，在 PRRSV 及其它動脈炎病毒中高度保守。研究證實，在成熟的動脈炎病毒粒子中，M 蛋白和 GP5 蛋白都以異源二聚體的形式存在，在病毒復制和組裝過程中發(fā)揮著核心作用。
有研究報道牛分枝桿菌重組表達 PRRSV M 蛋白免疫小鼠能夠誘導產(chǎn)生中和抗體，表明 M 蛋白上可能存在中和表位。此外，GP5 和 M 蛋白重組腺病毒共表達能夠誘導較高水平的中和抗體及較強的淋巴細胞增殖反應(yīng)，推測 M 蛋白的存在能夠增強抗 GP5 蛋白的免疫反應(yīng)。N 蛋白 由 ORF7 編碼的一種非糖基化的核衣殼蛋白，具有絲氨酸磷酸酶活性。核衣殼蛋白的磷酸化是尼多病毒目病毒的一個普遍特點，在病毒感染過程中發(fā)揮著重要的生物學功能。N 蛋白在病毒感染的豬和小鼠體內(nèi)都具有高度的免疫原性。研究表明，在 PRRSV 感染早期，機體主要產(chǎn)生抗 N 蛋白的抗體。這種抗體最早可在感染后一周檢測到，并且其下降速度要低于針對 GP5 蛋白和M 蛋白的抗體。因此 N 蛋白適合作為檢測 PRRSV 的特異性抗體以及診斷 PRRS 疾病的理想抗原。在成熟的病毒粒子上，N 蛋白以同源二聚體的形式存在。研究表明，北美洲型的 N 蛋白包含 3 個高度保守的半胱氨酸殘基，其中位于 23 位的半胱氨酸殘基參與形成了分子內(nèi)二硫鍵，在病毒感染過程中發(fā)揮著核心作用。此外，N 蛋白的核內(nèi)定位與病毒毒力、病毒調(diào)控宿主基因表達等致病機理相關(guān)的問題也有密切關(guān)系。
ORF2、ORF3 和 ORF4 分別編碼病毒的 3 個 N-糖基化的次要結(jié)構(gòu)蛋白 GP2、GP3 和 GP4。它們通過二硫鍵形成異源三聚體。完全嵌入 ORF2a 的 ORF2b 基因，編碼病毒的一種非糖基化的次要結(jié)構(gòu)蛋白 E。GP2 蛋白 屬于 I 型膜蛋白，它在 N 端有信號肽序列，C 端有結(jié)合細胞膜的錨定區(qū)域研究表明，GP2 蛋白的 N-端聚糖在病毒組裝過程中不是必需的部分。
GP3 蛋白 一個高度糖基化的 III 型膜蛋白，包含Ｎ端結(jié)構(gòu)域和 7 個潛在的 N-聚糖。研究表明，GP3 蛋白具有較強的抗原性。在感染 PRRSV 的豬體內(nèi)，雖然針對 GP3 蛋白的抗體水平較低，但在清除病毒感染中也發(fā)揮著一定作用，推測它可能與 GP5 和 M 蛋白一起參與了病毒中和反應(yīng)。
GP4 蛋白 屬于 I 型膜蛋白，它在 N 端也有信號肽序列，C 端有細胞膜的錨定區(qū)域。GP4 蛋白也是高度糖基化的蛋白。研究表明，GP4 蛋白包含不保守的中和表位，能夠誘導機體產(chǎn)生中和抗體。E 蛋白 一種非糖基化的次要結(jié)構(gòu)蛋白，具有高度的疏水性。E 蛋白具有潛在的 N-?；稽c和 II 型酪蛋白酶活性磷酸化位點。最近研究表明，N-?；稽c雖然對病毒的感染不是必需的，但是能促進病毒的復制。
