劉歡歡 中國農(nóng)業(yè)科學院
豬繁殖與呼吸綜合癥病毒的GPZ(GPZa)為糖蛋白，在I型和11型PRRSV中分別含有253和256個氨基酸。在其1一40氨基酸區(qū)域內(nèi)存在一個預測的N端信號序列，一個TM螺旋信號以及兩個氨基酸的跨膜區(qū)域。GpZ存在兩個保守的糖基化位點，I型為x73位和一79位氨基酸。11型為171和178位氨基酸，2004年獸醫(yī)報道這些位點的糖基化對病毒感染性的維持不是必須的。2010年Das等證實北美型 PRRSVFLzZ株中GPZ蛋白的N一84位糖基化位點是產(chǎn)生感染性病毒子代所必須的。
E蛋白或Zb蛋白由。盯Zb編碼，它完全嵌在由oRFZa編碼的oPZ(或稱作GPa)中。E蛋白為非糖基化的70一73個氨基酸大小的次要結(jié)構(gòu)蛋白。在EAV中E蛋白為病毒感染必須的，但是對病毒粒子的形成卻不是必要的。通過分析與該蛋白相似的禽流感中的MZ蛋白及甲病毒中的6K蛋白推測E蛋白極有可能參與病毒對細胞的融合或是內(nèi)化過程。
Gp4蛋白的大小從178個氨基酸(11型)到183個氨基酸(I型)不等。它是經(jīng)糖基化修飾的蛋白，共存在四個潛在糖基化位點分別為37、84、120、130位氨基酸，通過與存在三個糖基化位點的EAV比較，推測其至少有三個位點是被修飾的。2010年oas等證實該蛋白四個糖基化位點均被修飾 (nasetal，Zoloa)。GP3蛋白是PRRSV中糖基化程度最高的蛋白，它在I型中含265個氨基酸11型中有254個氨基酸。已被證實該蛋白在口株(l型或歐洲株)中大小約為45一50kDa。GP3的拓撲結(jié)構(gòu)還不甚清楚。預測在1一27和183~200位氨基酸區(qū)域各含有一個TM區(qū)。它是PRRSV中變異度處于第二位的蛋白，僅次于GPS蛋白。歐洲性和美洲型間的氨基酸同源性為54一 60%。變異最大的區(qū)域位于c端的30一50氨基酸殘基處，在該區(qū)域歐洲性的亞株比美洲型的多H個氨基酸。兩型間預測的外功能區(qū)相似度約70%。
第一個TM螺旋的預測是通過PRRsV與EAv的比較得出，但是EAV這一區(qū)域并非斷裂位點，這意味著在PRRSV中該蛋白是同時在N端和c端鑲嵌在膜上。在推測的胞外功能區(qū)中，GP3含有六個潛在的糖基化位點分別處于第29，42，50，131，152，160位氨基酸(I型中為29，42，50，131，152，159位)。通過SDS一PAGE發(fā)現(xiàn)GP3蛋白的分子量增加約為16kDa表明六個位點都被利用了，與EAv中的發(fā)現(xiàn)一致。針對FL12株GP3蛋白的研究表明，該蛋白含有七個潛在糖基化位點，但其195位糖基化位點是不被修飾的，因此只有六個位點是被添加糖鏈的 (Dasetal，Zolob)。盡管預測的oRF3約為27一29切a，明顯小于其凝膠檢測的40一sokoa。Gp3蛋白的前30個氨基酸包含一個信號膚區(qū)域，在蛋白成熟后就被剪切掉，因此該區(qū)域并不顯著影響蛋白的生物學性質(zhì)。在H型PRRSV的感染中，一些GP3蛋白被分泌到細胞介質(zhì)中，起初它被認為不是病毒的結(jié)構(gòu)蛋白。09年在11型pRRsV中證實Gp3存在于病毒表面。
通過重組桿狀病毒表達的GP3或重組痘病毒表達GP3/GPS發(fā)現(xiàn)它在動物體內(nèi)能引起部分免疫反應(yīng)研究表明GP3上有兩個在歐洲株和l美洲株都保守的，能被單抗識別的最小為點w74CRIGHDRCGED85和Y67EPGRsLw7。在一些毒株中，這兩個抗原識別位點的差異為兩個氨基酸。通過突變分析顯示，基因型的差異可能導致抗原性表位的改變。58一72aa，73一87aa，85~10zaa，102一 115aa，50一65aa，66一 slaa，80一95aa不 1194一logaa為通過westernblot鑒定出的抗原識別位點。針對ORF3的特異性單抗也只能與一部分毒株反應(yīng)，說明該蛋白的抗原多態(tài)性。
oPZa、GP3、GP4蛋白在兩型PRRSv中均是以三聚體的形式構(gòu)成病毒囊膜至少在I型PRRsv中E蛋白是這一蛋白聚合體的組成部分，缺失四個蛋白中的任何一個都會導致復合體無法形成。在EAV中以發(fā)現(xiàn)蛋白聚合體是通過幾個蛋白間的二硫鍵相互作用形成的，但在p雙sv中還未得到證實。對I型PRRSV而言，這幾個蛋白對病毒的感染性是必須的，但是對病毒粒子的形成是非必須的。GpZa與Gp4糖蛋白與受體CD1631間存在相互作用，病毒入侵宿主的尾聲階段是病毒進入細胞核，這一過程清道夫受體CD163發(fā)揮著重要作用，它與GPZa與GP4共同作用完成病毒基因組的釋放，E蛋白及至今尚未確定的胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶在這一過程中也發(fā)揮作用。
