付衍輝 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)
1.胰島素樣生長因子及其結(jié)合蛋白儀GF-s、IGFBP-s
獸醫(yī)研究發(fā)現(xiàn)IGF據(jù)有抑制顆粒細(xì)胞凋亡的作用。類胰島素生長因子(IGFs)IGF一I和IGF一11是單連多膚，分布于動(dòng)物卵巢中的顆粒細(xì)胞和膜細(xì)胞中，IGF一I可協(xié)同LH調(diào)節(jié)內(nèi)膜細(xì)胞中雄激素的產(chǎn)生，而IGF一n可以與FsH調(diào)節(jié)顆粒細(xì)胞分泌雌二醇。IGF也可作為促性腺激素的一種調(diào)節(jié)因子，促進(jìn)顆粒細(xì)胞內(nèi)類固醇的合成，其作用可被IGFBPs所抑制。
類胰島素生長因子結(jié)合蛋白 (IGFBPs)IGFBP一I可調(diào)節(jié)IGF一I的生物活性，抑制雄激素的產(chǎn)生。在優(yōu)勢(shì)卵泡中發(fā)現(xiàn)IGFBP一2，3，4表達(dá)量增加，說明IGFBP一s蛋白分解酶的活性增強(qiáng)。IGFBP一4，5在健康卵泡的膜細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，而在閉鎖卵泡的顆粒細(xì)胞中IGFBP一2，5表達(dá)量升高，膜細(xì)胞中IGFBP一2，4升高。卵泡的早期閉鎖與卵泡內(nèi)雌激素的下降和IGFBP一2，4，5上升有關(guān);后期閉鎖與雌二醇和IGFBP一S進(jìn)一步下降和上升有關(guān)。
2.成纖維細(xì)胞生長因子 (FGD)
FGF是一個(gè)由多種多膚因子組成的一個(gè)大家族，bFGF是這個(gè)家族的一員。卵巢內(nèi)的bFGF主要來源于顆粒細(xì)胞和黃體細(xì)胞。研究表明，bFGF是一個(gè)強(qiáng)的分裂原，參與卵泡的早期的發(fā)育調(diào)節(jié)，在哺乳動(dòng)物中bFGF可以促進(jìn)卵泡顆粒細(xì)胞的增殖，還能通過PKc途徑抑制性的調(diào)節(jié)cAMP依賴性蛋白激酶11型和Hp的活性和顆粒細(xì)胞的分化。
3.垂體腺昔酸環(huán)化酶激活膚(PACAP)
PACAP是一種新的下丘腦促垂體激素，也是一種新的神經(jīng)遞質(zhì)和神經(jīng)調(diào)質(zhì)，以PACAP一27和執(zhí)eAP一38兩種活性形式存在。
PACAP一38能刺激卵泡顆粒細(xì)胞中cAMP的積累和孕酮、雌二醇的分泌，并且隊(duì)CAP一38誘導(dǎo)。AMP能力比隊(duì)CAP一27強(qiáng)得多，研究發(fā)現(xiàn)顆粒細(xì)胞上的孕酮受體能反饋調(diào)節(jié)PAcAP基因的表達(dá)146，471。在卵泡凋亡模型的研究中發(fā)現(xiàn)，外源性的PACAP一38能抑制卵泡凋亡，并呈現(xiàn)劑量依賴型，而且LH抑制凋亡的作用能被隊(duì)CAP一38拮抗劑部分阻斷，所以隊(duì)CAP一38可以作為能被促性腺激素誘導(dǎo)的內(nèi)源性抗凋亡因子。
4.表皮生長因子伊GD、轉(zhuǎn)化生長因子 (TGD、腫瘤壞死因子
EGF能促進(jìn)顆粒細(xì)胞的增殖及誘導(dǎo)卵母細(xì)胞的成熟，同時(shí)體外培養(yǎng)大鼠的顆粒細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)表明，EGF可以抑制cAMP和FsH誘導(dǎo)雌激素的合成，使得卵泡內(nèi)雌激素和雄激素的比值下降，雌/雄激素比值下降會(huì)誘導(dǎo)卵泡閉鎖。
TGF因子包括TGFa和TGFp兩種活性因子，在閉鎖的卵泡中能明顯的發(fā)現(xiàn)TGFa和MYC蛋白。在卵巢內(nèi)TGFa和MYC蛋白聯(lián)合通過自分泌的途徑起到調(diào)節(jié)因子的作用，并參與卵子的生長、卵泡的分化和閉鎖。同時(shí)TGFa和TGFp還參與了對(duì)膜細(xì)胞的調(diào)節(jié)，兩者聯(lián)合可以清除閉鎖卵泡中的膜細(xì)胞。單獨(dú)的TGFp既可促進(jìn)卵泡分化，還能促進(jìn)卵泡閉鎖。體外實(shí)驗(yàn)還表明，TGFa或TGFp單獨(dú)作用不產(chǎn)生細(xì)胞凋亡，只有兩者聯(lián)合作用是才能促進(jìn)細(xì)胞的凋亡。
TNF是由T淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞產(chǎn)生，無種屬差異，其中TNFa存在與卵巢中，是一種多功能激素樣多膚，在調(diào)節(jié)卵巢微環(huán)境方面發(fā)揮重要作用，并能通過神經(jīng)鞘氨醇及IcE/cED一3連接半膚氨酸蛋白酶通路誘導(dǎo)多種細(xì)胞的調(diào)亡，I’NFa還可通過與TNF受體(TNFRs)1和2結(jié)合可以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡及細(xì)胞的增殖，TNFRI介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)凋亡信號(hào)如下:1)TNF和TNFRI的細(xì)胞外域結(jié)合，受體內(nèi)包含胞內(nèi)致死域DD;2)受體內(nèi)DD與與蛋白DD互相作用，形成TNFR一聯(lián)合蛋白DD，簡寫為 TRADD;3)TRADD的致死域與另一蛋白的致死域結(jié)合(Fas聯(lián)合蛋白DD;隊(duì)Dn);4)PADn能夠激活easpase一s的前體;5)Caspase級(jí)聯(lián)凋亡信號(hào)被激活，促使細(xì)胞凋亡。當(dāng)TNFRI作為抗凋亡因子時(shí)，其調(diào)控途徑如下:l)同上第一步;2)TRADD的致死域與受體內(nèi)的的致死域相互作用 :3)TRADD的致死域和受體相互作用蛋白(RIP)的致死域結(jié)合;4)INTR一聯(lián)合因子2(TRAF2)與RIP作用;5)TRAFZ調(diào)控TNFRI信號(hào)復(fù)合體，并誘導(dǎo)凋亡蛋白1和kB激酶的抑制劑;最終將促進(jìn)抗凋亡基因的表達(dá)。TNFRZ的調(diào)控途徑和1有所不同，如下:l)，I’ NFa與TNFRZ的細(xì)胞外域 ;2)TRAFZ直接與TNFRZ作用;3)NF一kB激活;4)抗凋亡基因表達(dá)受正調(diào)節(jié)，阻止TNFa誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。因此，TNFa和它的受體系統(tǒng)在卵泡生長的過程中既能誘導(dǎo)顆粒細(xì)胞的凋亡又能誘導(dǎo)其增殖。
5.FasL與Fas系統(tǒng)
FasL是一種在結(jié)構(gòu)上與TNF具有同源性的蛋白家族成員，主要在自然死亡的細(xì)胞、激活的T淋巴細(xì)胞和少數(shù)免疫組織中表達(dá)，通過Fas誘導(dǎo)靶細(xì)胞的凋亡。Fas屬于TNF/NGF受體家族中的一種跨膜糖蛋白，具有調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡的作用。這個(gè)體系凋亡信號(hào)的傳導(dǎo)方式如下:細(xì)胞接受凋亡信號(hào)以后，F(xiàn)asL以三聚體的形式和Fas結(jié)合，結(jié)合后Fas被激活;Fas相關(guān)蛋白的致死域激活Fas的細(xì)胞內(nèi)域;caspase一8的前體結(jié)合帶有死亡結(jié)構(gòu)域的Fas相關(guān)蛋白(FADD)，形成Caspase一8前體同型二聚體，隨后Caspase一8的前提被激活，接著下游的Caspase一3的前提被激活，激活的Caspase一3將誘導(dǎo)凋亡。同時(shí)Fas一FasL作為一種重要的凋亡途徑參與了體內(nèi)的多種病理過程，如造血功能障礙、獲得性免疫綜合癥、自身免疫性疾病等。
6.TRAIL與TRAIL受體
TRAIL(也叫APO)是一種細(xì)胞死亡受體，是腫瘤壞死因子(TNF)超家族成員，它的基因序列與FsaL的序列相似，在體內(nèi)的功能也與TNFa和FasL相似，在卵巢或組織中表達(dá)。
TRAIL相關(guān)的死亡受體包括:DR4和DRS，近年來還發(fā)現(xiàn)一種受體稱作“誘導(dǎo)”受體 (ocR)，包含:DcRI和DcRZ。TRAIL與不同受體結(jié)合后既能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡還能促進(jìn)細(xì)胞增殖。
TRAIL經(jīng)死亡受體介導(dǎo)起誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用，分為線粒體途徑和外在途徑。線粒體途徑由Bid斷裂觸發(fā)，經(jīng)Bcl一2家族介導(dǎo)，最終使線粒體外膜形成空隙，促發(fā)凋亡因子的釋放引起凋亡。外在途徑如下:TRAIL與死亡受體結(jié)合，形成死亡誘導(dǎo)信號(hào)復(fù)合體(nlse)中的隊(duì)Dn區(qū)域激活Ca印ase一8，進(jìn)而激活easpas。途徑(easpase一3、6、7)，引起細(xì)胞的凋亡。
TRAIL與“誘導(dǎo)”受體 (DcRI，DcR2)結(jié)合能介導(dǎo)細(xì)胞的抗凋亡途徑，結(jié)合后觸發(fā)次級(jí)死亡信號(hào)復(fù)合體，而后激活MAPK、JNK和NF一kB，這些因子可以轉(zhuǎn)錄抗凋亡因子C認(rèn)P和Mcl一1等，對(duì)抗凋亡基因的表達(dá)進(jìn)行調(diào)節(jié)，使細(xì)胞免于TRAIL誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。
