孫黎 西北農(nóng)林科技大學(xué)

    豬圓環(huán)病毒相關(guān)疾病的診斷必須將臨床癥狀、病理變化和實(shí)驗(yàn)室的病原或血清學(xué)檢測(cè)等進(jìn)行相結(jié)合分析才能得到可靠的結(jié)論，臨床癥狀只是一個(gè)很重要的判斷依據(jù)而已，還需要大量的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。

1. 病毒分離鑒定

    一般采取患病豬的肺和淋巴組織，無(wú)菌處理后，接種于無(wú)污染的 PK-15 細(xì)胞中，進(jìn)行電子顯微鏡觀察、PCR 檢測(cè)及 IFA 確認(rèn)。Opriessnig 等從患 PMWS 的病豬上分離到 12 株 PCV-2，經(jīng)過(guò)病毒分離，結(jié)合血清學(xué)檢測(cè)方法，發(fā)現(xiàn)其中 9 株與 PCV-2A型相似性很高，另外 3 株與 PCV-2B 型相似性很高。Morandi 等通過(guò)病毒分離與免疫組化檢測(cè)了患有繁殖障礙和肺壞死而死亡的病豬，檢測(cè)到了主要的病原有PRRSV 和 PCV-2。雖然病毒分離檢測(cè)方法是最可靠的檢測(cè)方法，但是由于其耗費(fèi)操作時(shí)間，還需要與其他的檢測(cè)方法共同診斷，所有不適于 PCV-2 的快速檢測(cè)，也不適合臨床樣品的快速檢測(cè)需要。

2 血清學(xué)與免疫學(xué)檢測(cè)

2.1酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）

    Yin 等建立了針對(duì) PCV-2 cap 蛋白的間接酶聯(lián)免疫吸附法（TcELISA），與間接免疫熒光法進(jìn)行了對(duì)比試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，其與后者的相符度幾乎為 100%。Huang 等建立了對(duì) PCV-2 的單克隆抗體 ELISA 檢測(cè)方法，其用 PCV-2 的血漿中和抗體同時(shí)還做了血清中和試驗(yàn)，對(duì)比后發(fā)現(xiàn)這個(gè)方法更加簡(jiǎn)化、特異、敏感和方便，是一種非常合適檢測(cè) PCV-2 的方法。

2.2免疫組織化學(xué)法

    Hansen 等對(duì)感染的 PCV-2 引起的繁殖障礙性疾病的病豬進(jìn)行檢測(cè)，經(jīng)過(guò)對(duì)免疫組織化學(xué)法（IHC）和定量 PCR 方法的對(duì)比表明，單獨(dú)使用 IHC 方法適合于在病情非常嚴(yán)重時(shí)的檢測(cè)，而定量 PCR 檢測(cè)感染時(shí)間范圍更廣；試驗(yàn)也表明母豬感染 PCV-2 時(shí)，子宮內(nèi)的 IgG 檢測(cè)是不可靠的。其同時(shí)對(duì) 2010 年丹麥患136 個(gè)呼吸道疾病綜合征的豬和 36 無(wú)肺部病變豬的腎臟中 PCV-2 用 IHC 方法進(jìn)行了檢測(cè)。

2.3間接熒光抗體試驗(yàn)

    車(chē)勇良等針對(duì) PCV-2 抗體用 PCV-2-Cap 蛋白建立了間接 ELISA 方法，結(jié)果顯示，建立的方法有很強(qiáng)的穩(wěn)定性特異性，對(duì)流行病學(xué)調(diào)查有很大的啟示。Patterson 等（2011）在北美用間接熒光抗體試驗(yàn)（IFATs）和 ELISA試劑盒進(jìn)行了 PCV-2

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