高慶 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
LPS是革蘭氏陰性菌(如大腸桿菌、沙門氏菌、奈瑟氏球菌屬等)細(xì)胞壁中參與形成獨(dú)特外層結(jié)構(gòu)的一類多糖。在某些病理情況下(如腸損傷)，LPS被吸收進(jìn)入血液循環(huán)后，與巨噬細(xì)胞表面受體CD14結(jié)合，會(huì)強(qiáng)烈刺激巨噬細(xì)胞產(chǎn)生IL一1、IL一6和TNF一a等炎性細(xì)胞因子，導(dǎo)致炎性反應(yīng)，動(dòng)物出現(xiàn)發(fā)熱、厭食和生產(chǎn)性能下降。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，LPs攻毒極顯著降低攻毒組仔豬各期ADFI、0一14d的ADG和G/F。這與前人的研究結(jié)果一致，說明本試驗(yàn)成功實(shí)施了LPs攻毒，并明顯導(dǎo)致了仔豬的生長(zhǎng)抑制。
目前獸醫(yī)認(rèn)為，LPS導(dǎo)致的生長(zhǎng)抑制與其影響 GH/IGF-I軸偏移以及細(xì)胞因子分泌有關(guān)。cD曠 /cDS+比值可以用來衡量免疫系統(tǒng)被激活的程度，比值高則說明免疫激活狀態(tài)較強(qiáng)，反之則免疫激活狀態(tài)較弱或被抑制。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，經(jīng)三次LPs攻毒后仔豬外周淋巴 CD3+CD4+/CD3+CDS+極顯著升高，說明LPS已激活了仔豬的免疫系統(tǒng)。這和賴長(zhǎng)華的研究結(jié)果一致，他用LPs兩次攻毒后導(dǎo)致仔豬CD4+/CDS+顯著升高。本試驗(yàn)結(jié)果顯示三次LPS攻毒后仔豬外周淋巴CD3+極顯著降低。
CD3分子表達(dá)于成熟的T細(xì)胞表面，它與TCR以非共價(jià)鍵結(jié)合形成的TCR一CD3復(fù)合物是T細(xì)胞識(shí)別抗原并轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào)的主要單位。推測(cè)本試驗(yàn)條件下，外周CD3十細(xì)胞，即成熟T細(xì)胞的顯著下降可能和LPS導(dǎo)致淋巴細(xì)胞凋亡數(shù)量上升有關(guān)，也即多次被LPS活化后的免疫系統(tǒng)可能出現(xiàn)了外周耐受。試驗(yàn)結(jié)果顯示多次LPS攻毒后仔豬外周CD3+CDS十降低，表明機(jī)體抗病力可能有所下降。這和賴長(zhǎng)華的研究結(jié)果有差異，原因可能在于本試驗(yàn)LPS攻毒劑量更高、次數(shù)更多和時(shí)間間隔更短，強(qiáng)度更大的LPS毒害或許導(dǎo)致了機(jī)體一定程度的免疫耐受甚至免疫損傷。
本試驗(yàn)中LPS對(duì)外周CD3+CD4+影響未達(dá)顯著，但顯著影響了CD4+兩類細(xì)胞之間的對(duì)比(Thl/Th2)。結(jié)果顯示LPS攻毒提高了仔豬血清TNF一a/IL一 4(Th1/Th2)，亦即在LPs攻毒更利于增進(jìn)炎癥T細(xì)胞(Thl)活性。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，LPS攻毒提高了仔豬血清IL一IB和TNF一a的含量，這和前人的研究結(jié)果一致，說明本試驗(yàn)多次肌肉注射的LPs后導(dǎo)致仔豬機(jī)體發(fā)生了炎性反應(yīng)。
結(jié)果顯示，仔豬血清IL一10含量在LPS攻擊后也極顯著上升。IL一10可由多種免疫細(xì)胞產(chǎn)生，是一種有效的抗炎性因子:可以抑制由LPS激活的單核細(xì)胞等產(chǎn)生IL一1、IL一6、IL一8、TNF一a、MIP一la等促炎因子和趨化因子，還可下調(diào)MHCll類分子、CDSO等的表達(dá)，協(xié)同抑制LPS誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞產(chǎn)生NO等，具有促進(jìn)前B細(xì)胞增殖，抑制T細(xì)胞激活和誘導(dǎo)T細(xì)胞的免疫耐受等免疫調(diào)節(jié)功能。
因而，本試驗(yàn)中LPs攻毒導(dǎo)致仔豬血清IL一10含量顯著增加可以部分解釋外周淋巴CD3+降低的結(jié)果。而在LPS攻毒后炎性因子和抗炎因子都出現(xiàn)顯著上升，這可能是機(jī)體一種減少免疫損傷的應(yīng)對(duì)‘機(jī)制。皮質(zhì)醇由下丘腦一垂體一腎上腺軸分泌，對(duì)于免疫反應(yīng)有負(fù)反饋調(diào)節(jié)作用，可下調(diào)炎癥反應(yīng)，其含量上升是應(yīng)激反應(yīng)的重要標(biāo)志。前人研究報(bào)道，LPs刺激機(jī)體時(shí)，下丘腦一垂體一腎上腺皮質(zhì)軸會(huì)被激活，導(dǎo)致皮質(zhì)醇迅速升高，應(yīng)激和防御反應(yīng)啟動(dòng)。
本試驗(yàn)結(jié)果與之一致，LPs攻毒極顯著提高了仔豬的血清皮質(zhì)醇水平。本試驗(yàn)LPS攻毒極顯著提高仔豬第7d血清葡萄糖。這和前人在鼠和豬上的研究報(bào)道結(jié)果一致。LPs導(dǎo)致高血糖癥的發(fā)生可能和機(jī)體產(chǎn)生胰島素耐受有關(guān)。有研究報(bào)道，LPS通過NF一妞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路誘導(dǎo)產(chǎn)生細(xì)胞因子TNF一和IL一lp等的表達(dá)，選擇性地?fù)p傷胰島p一細(xì)胞，造成胰島細(xì)胞功能紊亂，減少胰島素合成分泌。而本試驗(yàn)LPS攻毒后經(jīng)過14d恢復(fù)的仔豬(第 2ld)血清葡萄糖顯著低于未攻毒仔豬，推測(cè)機(jī)體可能反饋性地提高了胰島素敏感性，這對(duì)于恢復(fù)階段的仔豬補(bǔ)償生長(zhǎng)可能有積極意義。
綜上所述，本試驗(yàn)實(shí)施的LPS攻毒導(dǎo)致了仔豬生長(zhǎng)性能下降，免疫系統(tǒng)被激活，外周T淋巴細(xì)胞下降，炎性細(xì)胞活性增加，炎性細(xì)胞因子和抗炎細(xì)胞因子分泌增加，血清皮質(zhì)醇含量激增而血清葡萄糖濃度出現(xiàn)顯著變化，表明以LPS攻毒所建立的模型成功，可以應(yīng)用于研究評(píng)價(jià)功能性養(yǎng)分(FA)對(duì)仔豬免疫功能的影響。
