高慶 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
由于免疫應(yīng)激在動物生產(chǎn)中比較普遍，如用免疫應(yīng)激模型來評價功能性養(yǎng)分對于動物機體免疫功能的影響則具備實用價值。豬的免疫應(yīng)激源很多，包括豬場病原性或非病原性微生物、疫苗和異源蛋白等能刺激豬免疫系統(tǒng)的物質(zhì)?？衫眠@些免疫應(yīng)激源建立免疫應(yīng)激模型。在之前畜牧人的研究報道中，對照組可采用對豬舍進(jìn)行消毒或?qū)嵤案綦x早期斷奶”和“全進(jìn)全出”等措施來減少豬群與病原體接觸，而免疫應(yīng)激組豬群則與豬場病原體密切接觸，從而建立比較接近生產(chǎn)實際的模型。
但這類模型存在穩(wěn)定性差而風(fēng)險高、不易控制應(yīng)激程度、缺乏特異性敏感指標(biāo)來衡量等缺點。另可采用毒素(如LPs)或病原體(如大腸桿菌、輪狀病毒)攻擊感染健康豬來建立模型，這是目前建立免疫應(yīng)激模型的趨勢。免疫應(yīng)激源效應(yīng)不一，而建立這類模型時可選用特定己知功效的抗原、毒素或病原體攻擊健康動物機體，能有目的地使機體處于特定的免疫應(yīng)激狀態(tài)。依據(jù)受到攻擊后機體所處免疫應(yīng)激狀態(tài)的不同，可將免疫應(yīng)激模型分為免疫抑制模型和免疫活化模型。從豬腹膜、肌肉或靜脈注射一定劑量的LPS，激活豬的免疫系統(tǒng)，這是目前常用的免疫活化模型。LPS是革蘭氏陰性菌(如大腸桿菌、沙門氏菌、奈瑟氏球菌屬等)細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)物質(zhì)，能誘導(dǎo)豬產(chǎn)生細(xì)菌感染后的癥狀，如厭食、嗜睡和發(fā)熱等。LPS與巨噬細(xì)胞表面受體CD14結(jié)合，可刺激巨噬細(xì)胞合成和分泌IL一1、IL一6等炎性細(xì)胞因子，急速地激活豬的免疫抵抗機制，導(dǎo)致豬免疫系統(tǒng)活化。
一般情況下，LPs誘導(dǎo)急性的免疫激活，應(yīng)激反應(yīng)持續(xù)的時間較短，而次數(shù)過多的LPS刺激又可能使豬產(chǎn)生耐受性。而較長的應(yīng)激持續(xù)時間才有利于進(jìn)行動物營養(yǎng)方面的研究。本課題組在前人研究基礎(chǔ)上，經(jīng)過預(yù)試驗確定了LPS注射劑量和注射頻次，建立了應(yīng)激持續(xù)時間為7d的LPs免疫激活模型。盡管LPs刺激與豬場中活細(xì)菌誘導(dǎo)的免疫反應(yīng)并不一樣，LPs模型也不能完全模擬在實際豬場條件下常見的慢性免疫應(yīng)激，但LPS攻毒建模還是因為其效應(yīng)比較確定，以及應(yīng)激程度相對可控制，而應(yīng)用較普遍。本課題組已多次成功地將LPS攻毒模型應(yīng)用于動物營養(yǎng)與免疫的研究。
生產(chǎn)上Pcv一2感染仔豬危害巨大，Pcv一2感染可導(dǎo)致仔豬出現(xiàn)免疫抑制。利用PCV一2攻毒所建立免疫抑制模型可以更接近生產(chǎn)。PCV一2是一種嗜單核一巨噬細(xì)胞性的病毒，感染單核一巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞卻不在其內(nèi)復(fù)制，也不引起巨噬細(xì)胞凋亡，而B細(xì)胞可能是其復(fù)制的重要靶細(xì)胞，Pcv一2感染將弓}起B(yǎng)細(xì)胞凋亡，感染初期的PMws豬淋巴組織和骨髓樣組織的凋亡指數(shù)卻比對照組低;感染pCV一2引起豬組織IL一4、IL一10、IFN一a、MeP一1等細(xì)胞因子的水平發(fā)生變化，淋巴細(xì)胞不能有效地激活和增殖，巨噬細(xì)胞表面抗原MHC一I類分子和MHC一n類分子表達(dá)下降，而增殖不足的影響大于細(xì)胞凋亡，使外周血液中B細(xì)胞和T細(xì)胞減少等對免疫系統(tǒng)的損傷和抑制。本試驗室已經(jīng)成功利用PCv一2攻毒的建立了仔豬免疫抑制模型。
