馬豐英 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
1弱毒和滅活疫苗
中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所研制的豬喘氣病弱毒苗，能使免疫豬在攻強(qiáng)毒后肺組織的保護(hù)率達(dá)80%，且免疫持續(xù)8個(gè)月。但該疫苗存在成本較高、產(chǎn)量很低、副反應(yīng)大，胸腔注射的途徑操作不方便，且不能對(duì)已發(fā)病的豬群注射。江蘇省農(nóng)科院畜牧獸醫(yī)研究所的168株弱毒苗保護(hù)率高達(dá)84.4%，免疫期可達(dá)6個(gè)月，但僅對(duì)雜交豬安全，對(duì)地方豬安全性不高。美國(guó)輝瑞公司的“瑞倍適”采用肌肉注射簡(jiǎn)便易行，可有效減少肺部損傷，但需多次免疫使成本增加。
2基因工程疫苗
人們希望借助基因工程的方法，通過(guò)大量表達(dá)豬肺炎支原體的免疫原性蛋白來(lái)研制有效的疫苗，以期解決傳統(tǒng)疫苗制備方法中抗原制備難的問(wèn)題。
2.1勃附因子相關(guān)疫苗
Chen等用缺失△111假單胞桿菌外毒素PE與p97的RRI區(qū)16拷貝AAKPV(E)的融合蛋白制成亞單位疫苗，免疫小鼠和豬的效果較好，但對(duì)強(qiáng)毒株的保護(hù)力有待驗(yàn)證。 Yoshihiroshimoji等用表達(dá)p97基因的RI和R2區(qū)及丹毒桿菌表面保護(hù)抗原spaA.1的弱化丹毒桿菌YS一1免疫豬，發(fā)現(xiàn)肺部的損傷明顯降低，呼吸道可檢到抗p97特異性 IgA。 OkambaFR用表達(dá)P97C末端的復(fù)制缺陷型腺病毒rAdP97C通過(guò)滴鼻和肌注兩種途徑免疫小鼠，血清和支氣管肺泡灌洗液有較高的特異性lgG抗體。王亮等則證實(shí)Dnak一p97刺激小鼠產(chǎn)生針對(duì)p97的抗體。
2.2核普酸還原酶相關(guān)疫苗
PeterK等用豬肺炎支原體NulF的R2亞基C末端的融合蛋白所制備的疫苗對(duì)豬進(jìn)行免疫，并用豬肺炎支原體的野毒株進(jìn)行攻毒試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)免疫組比對(duì)照組的肺組織損傷有著明顯減輕。PeterK等將該片段克隆至沙門氏菌表達(dá)系統(tǒng)制成活疫苗，小鼠口服后血液和肺部抗豬肺炎支原體的IgG和IgA明顯增加。僅用純化的該雜和蛋白接種時(shí)，血清和肺中抗此雜和蛋白的IgG顯著增加，IgA卻增加有限。
2.3表達(dá)文庫(kù)免疫
Mooe:RJ等從豬肺炎支原體以大腸桿菌質(zhì)粒表達(dá)載體構(gòu)建的表達(dá)文庫(kù)，篩選到1500個(gè)克隆子，隨機(jī)分為5個(gè)亞文庫(kù)，提取各亞文庫(kù)的克隆混合質(zhì)粒免疫豬，發(fā)現(xiàn)分別含有96和480個(gè)克隆的兩個(gè)亞文庫(kù)組保護(hù)率達(dá)到750。
2.4DNA疫苗
ehen等構(gòu)建nNA疫苗peDNA3/p42并免疫小鼠，IgGI和IgGZ。在前8周為對(duì)照組的64倍，同時(shí)IFN一Y、IL一2、IL一4和mRNA的水平也上升，脾細(xì)胞的增殖加強(qiáng)，表明該疫苗能同時(shí)誘導(dǎo)產(chǎn)生Thl和ThZ免疫反應(yīng)。
2.5膚疫苗
膚疫苗是通過(guò)合成產(chǎn)生特異反應(yīng)的免疫原抗原決定簇部分的膚，從而有效避免傳統(tǒng)疫苗抗原成分復(fù)雜或病原變異及毒力可能恢復(fù)的缺陷。而噬菌體膚庫(kù)的構(gòu)建及篩選技術(shù)在膚疫苗的設(shè)計(jì)方面有著巨大的潛力。Yang等將SPF小鼠接種含有豬肺炎支原體免疫原蛋白抗原決定簇的噬菌體，小鼠產(chǎn)生較強(qiáng)的血清IgG反應(yīng)和IgA抗體。
