馬豐英 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
獸醫(yī)利用分子克隆、定點(diǎn)突變以及重組表達(dá)等技術(shù)，成功獲得豬肺炎支原體的主要免疫原蛋白p46和p65。通過小鼠的免疫試驗(yàn)可見，含有p36+P46+P65蛋白和含有 P36+P46+P65+P97RI一Nrdf蛋白的豬支原體肺炎亞單位疫苗均可通過激活體液免疫和細(xì)胞免疫途徑，從而產(chǎn)生了針對豬肺炎支原體的特異性抗體以及相關(guān)細(xì)胞因子。
利用基因工程相關(guān)技術(shù)，構(gòu)建了以asd基因缺失株減毒豬霍亂沙門氏菌C50O為載體分別表達(dá)豬肺炎支原體主要免疫原抗原p46和p65蛋白的重組菌株 C46(PYA一46)和C65(pYA一65)，并與重組菌株 C36(PYA一36)、C97RI一Nulr(nYA一97RI一Nrd幻相給合研制豬支原體肺炎的基因工程活疫苗。經(jīng)小鼠免疫試驗(yàn)證明，構(gòu)建的豬支原體肺炎基因工程活疫苗對小鼠均具有較好的免疫原性，除了能誘導(dǎo)較高水平的體液免疫外，還產(chǎn)生一定水平的細(xì)胞免疫反應(yīng)，并且采用肌注方式免疫時(shí)，其免疫原性更好。
利用原核表達(dá)可溶性的豬肺炎支原體免疫原性膜蛋白p36蛋白為免疫原，成功地篩選到19株特異性的抗p36蛋白的單克隆抗體細(xì)胞株，并利用篩選得到的特異性單抗，建立了一種用于檢測豬肺組織中豬肺炎支原體的免疫組化方法。該方法定位準(zhǔn)確且成本較低，從而為豬肺炎支原體的診斷以及該病的預(yù)防和控制打下基礎(chǔ)。
