劉啟文 上海師范大學(xué)
HEV抗原表位多是圍繞在ORF1、ORF2和ORF3上，其中大多特異性抗原表位在ORF2中，目前對戊型肝炎病毒的表位研究大多是針對人的。Kaur等在根據(jù)ORF1序列設(shè)計合成的系列多肽片段中，發(fā)現(xiàn)人類線狀B細胞抗原表位存在于12個獨立的多肽片段。ORF3編碼的蛋白主要參與產(chǎn)生急性期血清抗HEV IgG抗體，其抗原表位集中于第91-123aa，具有型特異性，利用不同型ORF3作診斷試劑，不但可以準確檢查出戊肝病毒基因型，而且對診斷急性戊肝有意義。
ORF2上抗原表位數(shù)量多，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，大多數(shù)分布在C端2/3部分。越來越多的研究表明其C端的2/3部分含有多個具有免疫優(yōu)勢的B細胞表位，包括能誘導(dǎo)免疫保護力的抗原表位（Li F等，1997），因而廣泛應(yīng)用于HEV感染的免疫診斷及疫苗研究。已經(jīng)定位了在ORF225-38，341-354，517-530，319-340，422-437，631-648，641-660，390-470和546-580aa上有九個抗原決定簇區(qū)段，并且在394-470aa之間至少含有5個不同免疫活性的抗原表位。Purdy等在研究大腸桿菌表達的HEV-trpE融合蛋白C2（24-660aa）時，指出ORF2蛋白C端2/3的部分其抗原表位與高級結(jié)構(gòu)有關(guān)。Meng等在此基礎(chǔ)上首先發(fā)現(xiàn)并確定ORF2編碼蛋白的C末端452-617aa存在中和抗原表位，Schofield等用黑猩猩抗HEV抗體建立了噬菌體展示庫，用兩種ORF2重組蛋白抗原對此庫進行篩選，確定了中和抗原表位在ORF2的C端。
對豬戊型肝炎病毒診斷表位的篩選的研究，最早是Meng 等利用SF9細胞中表達的人HEV（Sar55）ORF2 重組蛋白作為ELISA 包被抗原來檢測HEV抗體，以免疫前和超免疫陽性血清分別作為陰性、陽性對照，并使用阻斷ELISA作為確證實驗，測出美國中西部豬群HEV 抗體陽性。
Meng等之后進一步用重組人HEV衣殼抗原來檢測豬HEV抗體。彭小兵以豬HEV 新疆株swCH25 ORF2（367-671aa）基因工程表達蛋白p305 ORF2 作為包被抗原，以豬HEV 陽性血清作為第一抗體，以HRP 標記的SPA（HRP-SPA）代替酶標抗體作間接ELISA 來檢測采自江蘇、河南和山東地區(qū)的豬血清中的HEV IgG。ET2.1是一個含有主要構(gòu)象的表位的重組抗原，這個重組抗原可以用間接ELISA方法來檢測豬HEV。
另外，利用重組蛋白ET2.1和過氧化物酶標記做成的雙抗原夾心法可以用來檢測人和豬的總抗體（IgG和IgM）。Zhao等對豬戊型肝炎病毒的診斷表位進行了系統(tǒng)的篩選。我們利用計算機從豬HEV swCH25 毒株 ORF1、ORF2、ORF3的蛋白中識別并合成了12個多肽抗原區(qū)。用以上12個合成多肽抗原用豬HEV陽性血清做ELISA試驗，篩選出位于ORF3上的swHEV11（91-114）抗原為最佳多肽抗原體，將具有抗原性的多肽包被ELISA板子具有很好的特異性、靈敏度和重復(fù)性，說明該多肽表位是豬HEV特異性的抗原表位。
