余騰 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
根據(jù)豬萎縮性鼻炎流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果，畜牧研究人員選定其中某一豬場，對其進行萎縮性鼻炎病原檢測，開展凈化研究。
1豬場采樣方案
對選定豬場的經(jīng)產(chǎn)母豬，后備母豬和種公豬分別進行逐頭采集鼻拭子樣品，對于哺乳仔豬，保育豬和育肥豬則按照1一5%的比例采集鼻拭子樣品。
2鼻拭子樣品的處理和檢測
采集的鼻.拭子樣品放入裝有500林LTsB培養(yǎng)基的EP管中，37℃搖床中培養(yǎng)6一8h。取出EP管按照3.2.1.1中方法制備巢式PCR模板，在對鼻試子樣品處理之前，應(yīng)先取出100協(xié)L鼻拭子菌液加入至滅菌EP管中，再向管中加入30林L80%滅菌甘油，一20℃保存鼻.拭子樣品，并做好一記錄。將處理好的鼻拭子樣品使用巢式PCR試劑盒進行擴增。
3陽性豬群凈化措施
通過巢式PCR試劑盒檢測出鼻拭子為陽性的經(jīng)產(chǎn)母豬，后備母豬或種公豬，則應(yīng)聯(lián)系種豬場迅速將其隔離，并隨后將其淘汰，不能做為種用豬;對于哺乳仔豬，保育豬或育肥豬的鼻拭子中檢測出陽性樣品，則應(yīng)迅速將其隔離飼養(yǎng)，同時做好同圈舍內(nèi)消毒工作。
當(dāng)有鼻拭子樣品通過巢式PCR試劑盒檢測為陽性時，對其保存的鼻拭子樣品在TSA固體培養(yǎng)基上進行劃線培養(yǎng)，同時進行產(chǎn)毒素多殺性巴氏桿菌的分離純化，并對疑似多殺性巴氏桿菌的菌落進行革蘭氏染色和PCR鑒定。
對鑒定為產(chǎn)毒素多殺性巴氏桿菌的菌株進行紙片藥敏試驗，選擇敏感合適的抗生素，對豬場的種豬群和受威肋、豬群進行抗生素治療，治療過程中注意聯(lián)合用藥，防止耐藥性的產(chǎn)生。
4凈化豬場豬群的監(jiān)測
豬場種豬群全群鼻拭子樣品采集完后，3個月和6個月后對種豬群鼻拭子(第一輪檢測陽性豬都要采集鼻拭子樣品)進行第一輪抽檢，抽檢種豬比例為10%。以后每年定期抽檢兩次，種豬抽檢比例都為10%。若有陽性鼻拭子種豬，則參照3中措施繼續(xù)開展凈化工作。場外引種進入場區(qū)時，應(yīng)及時采集鼻拭子樣品進行檢測，如若出現(xiàn)陽性豬只，立即進行隔離淘汰。
