劉建波 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院
人源的輸血傳播病毒（Torque teno virus,TTV），最早由Nishizawa于1997年從一例輸血后發(fā)生急性感染的非甲-戊型肝炎病人血清中發(fā)現(xiàn)，與肝炎有關(guān)，被認(rèn)為是人類圓環(huán)病毒。1998年證實(shí)國(guó)內(nèi)人群中也存在TTV感染。對(duì)肝炎患者、艾滋病病毒攜帶者等人群TTV感染的流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，TTV陽(yáng)性率達(dá)10%以上。在靈長(zhǎng)類、家養(yǎng)動(dòng)物以及老鼠的體內(nèi)也相繼發(fā)現(xiàn)TTV的存在，并以初乳途徑垂直傳播。Verschoor等首次在血清中檢測(cè)到豬輸血傳播病毒（Porcine torque teno virus，PTTV）。隨后，畜牧研究人員對(duì)西班牙豬群進(jìn)行的流行病學(xué)調(diào)查顯示豬源的PTTV陽(yáng)性率很高。國(guó)內(nèi)一些地區(qū)PTTV1和PTTV2的陽(yáng)性率達(dá)37%和21%以上，表明PTTV呈世界性流行。
1. 分類
豬輸血傳播病毒（Porcine transfusion transmitted virus, PTTV）或（Porcine torque teno virus,PTTV）以及其他動(dòng)物相關(guān)的TTV，最近被國(guó)際病毒分類委員會(huì)歸類于一個(gè)新建立的科：指環(huán)病毒科（Anelloviridae），下有九個(gè)病毒屬，包括 α TTV（Alphatorquevirus）、βTTV（Betatorquevirus）、γ TTV（Gammatorquevirus）、δ TTV（Deltatorquevirus）、ε TTV（Epsilontorquevirus）、η TTV（Etatorquevirus）、ι TTV（Iotatorquevirus）、θ TTV（Thetatorquevirus）、ζ TTV（Zetatorquevirus），豬輸血傳播病毒根據(jù)其基因型不同分為兩種類型，即PTTV1和PTTV2，均屬于屬于 ι TTV。
2. 形態(tài)結(jié)構(gòu)與理化性質(zhì)
TTV是一種無(wú)囊膜的單股負(fù)鏈環(huán)狀DNA病毒，在氯化銫中的浮力密度為1.31～1.33g/ml，病毒粒子的直徑為30～32nm，在蔗糖中的浮力密度為1.26g/ml，對(duì)DNaseⅠ和綠豆核酸酶敏感，但能抵抗Rnase A消化。
3. 培養(yǎng)特性
迄今為止，還沒(méi)有合適的細(xì)胞系適于TTV病毒的培養(yǎng)，有很多學(xué)者已致力于病毒增殖的研究。Fabrizio等用熒光定量PCR檢測(cè)了7位病人的血清中含有TTV，證明了TTV與外周血細(xì)胞之間的關(guān)系，其中6位病人的外周血單核細(xì)胞（PBMCs）和4位病人的多核淋巴細(xì)胞顯示TTV陽(yáng)性，但病毒的滴度很低；將PBMCs分成單核細(xì)胞、B細(xì)胞、T4、T8淋巴細(xì)胞亞群之后檢測(cè)，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)病毒，證明TTV優(yōu)先與某種或幾種細(xì)胞有關(guān)。將TTV陰性的PBMCs細(xì)胞與含病毒的血漿在4℃孵育的情況下，這些細(xì)胞能夠吸附可測(cè)量的病毒數(shù)量。用植物血凝素刺激的TTV陰性的PBMCs在體外與病毒陽(yáng)性血清和糞便抽提物混合后培養(yǎng)后，這些細(xì)胞能夠向懸浮液體中釋放出相當(dāng)水平的有感染性的TTV。用TTV刺激PBMCs獲得同樣結(jié)果。這些結(jié)果顯示，新鮮收集的PBMCs細(xì)胞不能夠產(chǎn)生病毒，但用TTV病毒刺激后能夠刺激PBMCs產(chǎn)生病毒的復(fù)制。盡管從感染的病人中分出的PBMCs中能夠檢測(cè)到TTV DNA，仍然不知道在PBMCs中的TTV是否是產(chǎn)生于細(xì)胞內(nèi)復(fù)制是否來(lái)自于吸附、細(xì)胞內(nèi)吞。最近，TTV DNA病毒的復(fù)制形式在骨髓細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn)，仍然沒(méi)有關(guān)于TTV在體外培養(yǎng)系統(tǒng)中復(fù)制的報(bào)告。PBMCs細(xì)胞能夠從感染的血漿中吸附相當(dāng)數(shù)量的TTV，附著結(jié)合的病毒很難被清洗下來(lái)。用PHA刺激過(guò)的TTV陰性的PBMCs再與TTV陽(yáng)性血漿或糞便提取物孵育后，徹底清洗，然后培養(yǎng)5周，選擇時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)TTV DNA的含量，在孵育后的第1周，懸浮上清中沒(méi)有或很少有病毒存在，緊接著病毒滴度出現(xiàn)2-3個(gè)對(duì)數(shù)的高度。在孵育后21-28天內(nèi)，所有的培養(yǎng)物恢復(fù)陰性狀態(tài)。在不同的實(shí)驗(yàn)組中，于培養(yǎng)的第2周中出現(xiàn)峰值，每毫升液體中病毒滴度在4.2×104～6.2×105之間變化。這些峰值太高，不能僅僅用吸附的病毒來(lái)解釋。
