劉建波 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院
獸醫(yī)利用抗原或抗體檢測的體外免疫反應(yīng)技術(shù)建立的診斷方法稱為血清學(xué)診斷方法。目前已經(jīng)建立多種血清學(xué)診斷方法，其中包括間接免疫熒光試驗（Indirect immunofluorescence assay，IIF）、免疫過氧化物酶單層細胞試驗（Immunoperoxidase monolayer assay，IPMA）、酶聯(lián)免疫吸附試驗（Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）等。Huang等首次對PTTV2假定ORF1殼體蛋白的氨基末端利用大腸桿菌表達系統(tǒng)進行了截短表達，對該蛋白進行純化。利用該純化的蛋白抗原分別建立了Western blot和ELISA方法，用于檢測豬血清中PTTV2抗體，用建立了ELISA方法對豬血清中進行了流行病學(xué)調(diào)查。
免疫電鏡技術(shù)，即免疫化學(xué)技術(shù)與電鏡技術(shù)結(jié)合的產(chǎn)物，是在超微結(jié)構(gòu)水平研究和觀察抗原、抗體結(jié)合定位的一種方法學(xué)。它主要分為兩大類：一類是免疫凝集電鏡技術(shù)，即采用抗原抗體凝集反應(yīng)后，再經(jīng)負染色直接在電鏡下觀察；另一類則是免疫電鏡定位技術(shù)。該項技術(shù)是利用帶有特殊標記的抗體與相應(yīng)抗原相結(jié)合，在電子顯微鏡下觀察，由于標準物形成一定的電子密度而指示出相應(yīng)抗原所在的部位。Yukio根據(jù)在含有TTV粒子滴度達到108/ml的HIV患者的血清的浮力密度在1.31-1.33 g/ml的部分通過電子顯微鏡觀察到球型病毒樣顆粒，直徑為30～32 nm。病毒粒子經(jīng)過富集后，與金標記的抗IgG抗體反應(yīng)后，通過免疫電鏡觀察，發(fā)現(xiàn)病毒粒子是與IgG抗體結(jié)合的方式存在的，并首次觀察到人源的TTV形態(tài)，但目前關(guān)于PTTV形態(tài)還沒有觀察到。
