徐麗麗 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
經(jīng)改造的減毒沙門氏菌以其無可比擬的優(yōu)越性一激發(fā)勃膜免疫、有效地遞呈外源抗原及免疫佐劑作用等，而被廣泛應(yīng)用于新型基因工程疫苗的研制。目前為止，已在表達(dá)腫瘤、病毒病、細(xì)菌病、寄生蟲病等的外源抗原方面取得了良好成果，從而開拓了以減毒沙門氏菌為疫苗載體的新領(lǐng)域，并隨著研究的深入，逐漸成為疫苗載體的研究熱點(diǎn)。國內(nèi)在這一方面的研究相對較少，且研究水平較低，徐引弟博士于2006年構(gòu)建了一株豬霍亂沙門氏菌載體系統(tǒng)，且已應(yīng)用于各種基因工程疫苗的研制中。
由PEDV引起的PED是一種高度接觸性的急性腸道傳染病，獸醫(yī)臨床特征主要表現(xiàn)為仔豬水瀉、嘔吐和脫水。自1971年首次發(fā)現(xiàn)PED及1978年首次得到鑒定以來，該病在全世界范圍內(nèi)廣泛流行，給養(yǎng)豬業(yè)造成了重大的經(jīng)濟(jì)損失。當(dāng)前，PED的發(fā)生呈現(xiàn)上升的趨勢，且常出現(xiàn)混合感染的報(bào)道，發(fā)病越來越復(fù)雜，因而受到廣大研究人員的關(guān)注。
PED具有發(fā)病急，傳播快的特點(diǎn)，目前尚尤有效治療方法，疫苗接種是預(yù)防本病發(fā)生的主要途徑之一。PEDV主要經(jīng)腸道感染豬，局部腸虱膜免疫系統(tǒng)在抗PEDV感染的免疫過程中發(fā)揮了重要的作用，因而刺激腸道勃膜產(chǎn)生的特異性slgA，成為研制PED疫苗關(guān)鍵的問題之一口國內(nèi)外學(xué)者已研制出了PEDV的滅活疫苗和弱毒疫苗，并已應(yīng)用于PED的預(yù)防。然而，已研制出的PED滅活和弱毒疫苗，不能刺激機(jī)體勃膜產(chǎn)生足夠的slgA，因而，PED現(xiàn)仍存在于豬場并經(jīng)常發(fā)生，這給養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展造成了嚴(yán)重危害，因此，利用基因工程技術(shù)，發(fā)展能有效刺激腸勃膜產(chǎn)生局部免疫應(yīng)答，進(jìn)而引起全身免疫反應(yīng)的新型疫苗，是免疫防治該病的重要研究方向。
PEDV基因工程疫苗研究的靶抗原主要集中在S蛋白。PEDVS蛋白的COE基因編碼的蛋白具有免疫原性，能夠誘導(dǎo)動(dòng)物機(jī)體產(chǎn)生中和抗體，起到保護(hù)動(dòng)物機(jī)體的作用。PEDVS蛋白的SID區(qū)攜帶了PEDv主要的B細(xì)胞抗原表位，能夠給機(jī)體提供免疫保護(hù)作用 。
減毒沙門氏菌除自身可以作為弱毒疫苗預(yù)防仔豬副傷寒外，同時(shí)，還可作為一個(gè)非常好的基因工程疫苗載體，且已被廣泛應(yīng)用于制備細(xì)菌、病毒和寄生蟲等的多價(jià)基因工程疫一苗領(lǐng)域中。鑒于此，本研究利用本實(shí)驗(yàn)室徐引弟博士構(gòu)建的豬霍亂沙門氏菌CSOO株asd缺失株平衡致死系統(tǒng)(2006年)，構(gòu)建表達(dá)了含有PEDV抗原表位基因(COE基因)和攜帶B細(xì)胞的表位基因(SD基因)的兩株重組菌株CSOI一COE和C501一SD，對其生物學(xué)特性進(jìn)行了研究，并以BalB/c鼠為動(dòng)物模型，鑒定了該重組菌株的免疫效力，評(píng)價(jià)其作為口服新型疫苗的應(yīng)用潛力，最后，觀察了該重組菌的初步臨床效果。本研究旨在研制一種安全、有效廉價(jià)的PEDV口服新型苗。
